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重组单个核小体H3K27ac-生物素
在体内,组蛋白被染色质中的DNA包裹着。因此,在体外研究中,核小体是比组蛋白和组蛋白衍生的肽更具有生理意义的底物。更重要的是,在HMT检测中使用核小体底物时,一些组蛋白甲基转移酶的活性以及特异性明显增强,如DOT1L和NSD家族酶。核小体也被广泛用于组蛋白甲基转移酶的筛选试验中,以确定小分子抑制剂用于药物开发。
重组单个核小体H3K27ac-生物素包括167bp的601个DNA,带有5'生物素标签和两个分子的组蛋白H2A,包括氨基酸1-130(末端)(登录号NP_003503. 1),H2B包括氨基酸1-126(末端)(登录号NP_003509.1),H3.1包括氨基酸1-136(末端)(登录号NP_003520.1),在赖氨酸27处有乙酰化,以及H4包括氨基酸1-103(末端)(登录号NP_003539.1)。组蛋白H2A、H2B和H4在大肠杆菌细胞中表达。H3K27ac被完全合成。组蛋白H3K27ac与本地组蛋白序列相对应,不包含任何氨基酸替换或残基类似物。组蛋白八聚体的分子量为~108 kDa。

重组单个核小体H3K27ac-生物素的质谱分析。合成的H3K27ac蛋白通过ESI-TOF质谱分析。预期质量=15313.8 Da。确定的质量=15313.8 Da。

组单个核小体H3K27ac-生物素,DNA凝胶。将单个核小体H3K27ac-生物素在2%琼脂糖凝胶上运行,用溴化乙锭染色。泳道1。DNA标志物。泳道2。601个DNA。泳道3。完整的单个核小体H3K27ac。Intact mononucleosomes.H3K27ac的迁移率比游离的601 DNA高得多。琼脂糖凝胶的结果显示几乎所有的601 DNA都包裹组蛋白八聚体形成核小体。 重组单个核小体H3K27ac-生物素通过Western blot检测 分别用抗H3K27ac抗体和抗H4抗体检测未修饰的核小体(泳道1)和重组单个核小体(H3K27ac)-生物素化(泳道2)。H4被检测为加载对照。只有重组单个核小体(H3K27ac)-生物素化的可以用抗H3K27ac抗体检测。
产品组分
内容 |
型号 |
规格 |
储存温度 |
重组单个核小体H3K27ac-生物素 | 81002 | 10ug | -80°C |
操作手册 |
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