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重组BRD3(24-144)蛋白
含溴结构域蛋白3(BRD3),也被称为RING3L,属于BET亚类蛋白,其特点是两个N端溴odomain和一个ET(Extra Terminal)结构域。BRD通过其识别乙酰化组蛋白赖氨酸残基的溴odomains与染色质结合。溴odomains作为这些表观遗传组蛋白标记的 "阅读者",通过将相关蛋白与乙酰化的核糖体目标连接起来,调节染色质结构和基因表达。ET结构域的功能是作为一个蛋白结合基团,并发挥非典型的丝氨酸激酶活性。BET家族在小鼠和人类中至少包括四个成员:BRD2(也称为FSRG1,RING3)、BRD3(FSRG2,ORFX)、BRD4(FSRG4,MCAP/HUNK1)和BRDT(FSRG3,BRD6)。BRD3以乙酰化依赖的方式结合和调节GATA1。GATA1是红细胞和巨核细胞特异性基因表达的关键调节因子,GATA1的突变与先天性贫血和巨核细胞白血病有关。有趣的是,BRD3与GATA1的紧密相互作用需要多种乙酰化修饰,结构数据显示,GATA1中两个相邻的乙酰化位点与一个溴odomain相互作用。BRD3蛋白的表达在激活的淋巴细胞中被诱导。此外,它在未分化的ES细胞中高度表达,并在内皮细胞分化时观察到表达量下降。在某些癌症中观察到BRD3的表达水平改变,如鼻咽癌和膀胱癌。BRD3还与LANA-1,即卡波西氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏期相关核抗原1相互作用,这是外显病毒基因组复制所需要的。
在大肠杆菌中表达了对应于24-144个氨基酸的肽,该肽含有BRD3的溴odomain序列(登录号NM_007371.3),含有N端His-Tag和C端FLAG-Tag,观察到分子量为20.5kDa。它显示了对乙酰化H3K18、H4K12、H4K20和H4K12/K16/K20的结合特异性。通过SDS-PAGE,该重组蛋白的纯度大于90%。
重组BRD3(24-144)蛋白凝胶。BRD3(24-144)蛋白在SDS-PAGE凝胶上运行,并用考马斯亮蓝染色。
重组BRD3(24-144)活性的HTRF检测。将3.3μM组蛋白肽H4K5/8/12/16(4Ac)与BRD3(24-144)蛋白在包括50mM HEPES-NaOH pH 7.0,0.1% BSA的反应缓冲液中在室温下孵育1小时。用抗Flag抗体来检测反应产物。
重组BRD3(24-144)活性的HTRF检测。将3.3μM组蛋白肽H4K5/8/12/16(4Ac)与BRD3(24-144)蛋白在包括50mM HEPES-NaOH pH 7.0,0.1% BSA的反应缓冲液中在室温下孵育1小时。用抗Flag抗体来检测反应产物。
产品组分
内容 |
型号 |
规格 |
储存温度 |
重组BRD3(24-144)蛋白 | 31379 | 100ug | -80°C |
重组BRD3(24-144)蛋白 | 31779 | 1mg | -80°C |
操作手册 |
1 | 1 |
常温 |
注意事项
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