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驱动蛋白生化分析试剂盒
真核驱动蛋白能协调细胞内的各种动力学活动。 研究表明,它们能沿着微管轨道移动染色体和囊泡等货物(1)。 它们在细胞骨架结构的组织中也扮演着重要角色,有丝分裂过程中微管纺锤体的建立就是证明(2)。
驱动蛋白利用 ATP 水解的能量沿微管(MT)基质运动。 一旦驱动蛋白马达与其 MT 轨道结合,马达的 ATPase 速率通常会提高几百至几千倍(3)。 MT 激活的驱动蛋白 ATPase 是电机功能的主要参数,也是在各种实验条件下监测和研究驱动蛋白活性的有力方法。
作为Motor Werks(CMW)系列研究试剂的一部分,开发了驱动蛋白 ELIPA™(酶联无机磷酸盐测定法)生化试剂盒。 该检测方法是对 Webb 最初描述的甘油激酶加 D-甘油醛 ATP 酶活性和肌动蛋白激活肌球蛋白 ATP 酶 (4) 检测方法的改良。 该检测方法基于 2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤核糖核苷(MESG)在无机磷酸盐(Pi)存在下催化转化为 2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤时发生的吸光度偏移(330 - 360 nm)。 该反应由嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)催化。 一分子无机磷酸盐将生成一分子 2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤,反应基本上是不可逆的 (5)。 因此,360 纳米波长处的吸光度与驱动蛋白 ATP 酶反应生成的 Pi 量成正比。
图 1. 用驱动蛋白生化分析试剂盒测量的微管激活的驱动蛋白 ATPase 活性。测量了部分驱动蛋白马达的 ATPase 活性。ATP 水解的最大 Vmax 从驱动蛋白 HC 的 10,000 nmol ATP/min/mg 到 Chromokinesin 的 470 nmol ATP/min/mg 不等。
驱动蛋白生化分析试剂盒具有如下优势和特点:
- 微管激活的驱动蛋白 ATP 酶活性的动力学测量
- 发现驱动蛋白抑制剂
- 测量驱动蛋白抑制剂的 IC50s
References
- Vale, R. D. and Fletterick, R. J. (1997). The design plan of kinesin motors. Ann. Rev. Cell Dev. Biol. 13: 745-777.
- Endow, S. A. (1999). Microtubule motors in spindle and chromosome motility. Eur. J. Biochem 262, 12-18.
- Johnson, K. A. and Gilbert, S. P. (1995). Pathway of the microtubule-kinesin ATPase. Biophys. J. 68, 173-179.
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- Cheng Q., Wang Z-X., and Killilea S. D. (1997). A continuous spectrophotometric assay for protein phosphatases. Anal. Biochem. 226, 68-73.
产品组分
内容 | 型号 | 规格 |
储存温度 |
驱动蛋白生化分析试剂盒 | CNBK060-01 | 96次 | 2-8°C |
驱动蛋白生化分析试剂盒 | CNBK060-02 | 192次 | 2-8°C |
操作手册 |
1 | 1 |
常温 |
注意事项
保存建议 | 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 |
FAQ
Author | Title | Journal | Year | Article Link |
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Perdomo, Doranda et al. | TbKINX1B: a novel BILBO1 partner and an essential protein in bloodstream form Trypanosoma brucei | Parasite | 2022 | Article Link |
Li, Qian Ru et al. | AMPK regulates anaphase central spindle length by phosphorylation of KIF4A | Journal of Molecular Cell Biology | 2018 | ISSN 1759-4685 |
Sheff, Joey G. et al. | Novel allosteric pathway of Eg5 regulation identified through multivariate statistical analysis of hydrogen-exchange mass spectrometry (HX-MS) ligand screening data | Molecular and Cellular Proteomics | 2017 | ISSN 1535-9484 |
Kadakkuzha, Beena M. et al. | High-throughput screening for small molecule modulators of motor protein kinesin | Assay and Drug Development Technologies | 2014 | ISSN 1557-8127 |
Abnous, Khalil et al. | Synthesis and molecular modeling of six novel monastrol analogues: Evaluation of cytotoxicity and kinesin inhibitory activity against HeLa cell line | DARU, Journal of Pharmaceutical Sciences | 2013 | ISSN 1560-8115 |
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