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核小体制备试剂盒
核小体制备试剂盒设计可用于从细胞中制备单核小体和寡核小体。核小体是染色质的最小亚单位,由 147 bp 的 DNA 组成,包裹着核心组蛋白(H2A、H2B、H3 和 H4)的八聚体。每个核小体之间由 DNA 连接子隔开。核小体制备试剂盒使用鸡尾酒酶消化连接子 DNA。通过调整消化时间,可以控制单核小体或寡核小体的提取量。与组蛋白或合成肽相比,分离的核小体更具生理相关性,因此非常适合用作组蛋白翻译后修饰分析、酶动力学或抑制剂筛选研究的底物。
从样品中轻松制备单核小体或寡核小体
图 1 显示了根据酶切鸡尾酒的消化时间调节用核小体制备试剂盒分离的单核小体或寡核小体数量的能力。图 2 将分离的核小体与纯化的核小体 DNA 进行比较,显示了核小体样品分子量的凝胶移动,从而证实核小体是完整的,DNA 包裹在组蛋白周围。
图 1:核糖体消化时间的 DNA 凝胶分析。从 HeLa 细胞中制备核小体,用酶剪切鸡尾酒消化 5、10 和 15 分钟。消化后,加入冰冷的乙二胺四乙酸停止反应。然后对核小体进行 DNA 纯化,以评估消化效率。通过 1.5 % 琼脂糖凝胶电泳分离样品
泳道 1:100 至 1000 bp DNA 梯形图。
泳道 2: HeLa 基因组 DNA。
泳道 3: 消化 5 分钟的 HeLa DNA。
泳道 4: HeLa DNA 消化 10 分钟。
泳道 5: HeLa DNA 消化 15 分钟。
图 2:与纯化的核小体 DNA 相比,完整核小体观察到的凝胶转移。按照核小体制备试剂盒的说明从 HeLa 细胞中制备核小体。然后对提取的 50 升等分核糖体进行 DNA 净化,以评估消化效率。完整的核小体和纯化的 DNA 样品都用 TapeStation 进行了分析。结果显示,与纯化的 DNA 样品相比,完整核小体的分子量带有所增加。这是因为完整的核小体复合物包含 DNA 和组蛋白。
泳道 A:25 至 1500 bp DNA 梯形图。
泳道 B1:完整的核糖体样品。
泳道 C1:纯化的核糖体 DNA。
核小体制备试剂盒具有如下优势和特性:
- 比合成肽更适合生理底物
- 适用于组蛋白翻译后修饰分析、酶动力学或抑制剂筛选研究
- 通过调整消化时间,可轻松调整单核糖体或寡核糖体的分离水平
产品组分
内容 |
型号 |
规格 |
储存温度 |
核小体制备试剂盒 | CN53504-01 | 20次 | -20°C |
核小体制备试剂盒 | CN53504-02 | 40次 | -20°C |
操作手册 |
1 | 1 |
常温 |
注意事项
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FAQ
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