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microRNA cDNA合成试剂盒
microRNA cDNA合成试剂盒是一种一体化、即用型产品,用于从总 RNA 制备物或富集 microRNA 制备物中反转录 microRNA。该试剂盒包含 2x 反应混合物和 microScript microRNA 酶混合物。该试剂盒使用的是microScript 逆转录酶,它是 Moloney Murine Leukemia Virus (M-MuLV) 逆转录酶的突变体。它降低了 RNase H 的活性,提高了热稳定性。
microRNA cDNA合成试剂盒的工作流程非常简单,只需将 2x 反应混合液、酶混合液和 RNA 模板混合后进行单管设置。然后在热循环仪中进行反应。首先在 RNA 模板上添加聚(A)尾,然后使用适配引物合成 cDNA。除了使用方便,单管装置还具有极高的一致性和灵敏度。cDNA 可用于 PCR 或 qPCR 扩增,使用通用 PCR 反向引物和包含相关 microRNA 序列的正向引物。单个 cDNA 制备可用于多种不同 microRNA 的 PCR 扩增。此外,如果以总 RNA 制备为起始模板,cDNA 制备还可用于 mRNA 或大 RNA 的 PCR 或 qPCR 检测(使用基因特异性正向和反向引物)。这样就可以同时评估 microRNA 和 microRNA 靶点的表达水平。图 1. 使用microRNA cDNA合成试剂盒从不同数量的 RNA 输入中高灵敏度、稳健地扩增 microRNA。在 RT-qPCR 反应中使用Norgens microScript microRNA cDNA 合成试剂盒从使用我们总RNA 化试剂盒分离的 HeLa 总 RNA 稀释系列中扩增人 miR-1246 和 miR-21。从 200 纳克到 2 pg 的广泛 RNA 输入中,PCR 目标均能得到稳健扩增。
图 2. 反转录所有 RNA 转录本(microRNA 和 mRNA)。microRNA cDNA合成试剂盒能有效反转录 microRNA 和其他 RNA 物种,如 mRNA 和大 RNA,从而实现了 microRNA 及其靶标的平行研究。使用microRNA cDNA合成试剂盒以 HeLa RNA(200 纳克)为模板进行反转录。得到的 cDNA 用于三种不同 RNA 的 qPCR 反应。上三幅图显示了 miR-21(microRNA)、5S rRNA(无 poly-A 尾的 RNA)和 S15(大 mRNA)的成功 PCR 扩增曲线。下面三幅图显示,三种 PCR 扩增均显示出独特的扩增片段,具有独特的熔融曲线特征。
microRNA cDNA合成试剂盒具有如下优势和特性:
- 便捷
- 一次 cDNA 合成,分析多种 microRNA 和 microRNA 靶点
- 节省时间
- 节约成本
- 高灵敏度和产量
- 稳健的酶
- 有 12 或 50 个反应规格可供选择
产品组分
内容 |
型号 |
规格 |
储存温度 |
microRNA cDNA合成试剂盒 | 54410 | 50次 | -20ºC |
microRNA cDNA合成试剂盒 | 54415 | 12次 | -20ºC |
操作手册 |
1 | 1 |
常温 |
注意事项
保存建议 | 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 |
FAQ
Plasma-derived exosomal miR-326, a prognostic biomarker and candidate for treatment of drug resistant pediatric acute lymphoblastic leukemia
Neda Saffari, Soheila Rahgozar, Fikrettin Sahin
Europe PMC | 2023 Apr 26
Moderate Endurance Training and MitoQ Improve Cardiovascular Function, Oxidative Stress, and Inflammation in Hypertensive Individuals: The Role of miR-21 and miR-222: A Randomized, Double-Blind, Clinical Trial
Yaser Masoumi-Ardakani, Hamid Najafipour, Zohreh Safi
Cell Journal (Yakhteh) | 2022 Oct 01 | PubMed ID: 36259475
CircSV2b participates in oxidative stress regulation through miR-5107-5p-Foxk1-Akt1 axis in Parkinson's disease
Quancheng Cheng, Jianwei Wang, Weiguang Zhang
Redox Biology | 2022 Aug 12 | PubMed ID: 35973363
The Impact of Storage Condition and Duration on Function of Native and Cargo-Loaded Mesenchymal Stromal Cell Extracellular Vesicles
Levy Daniel, Jeyaram Anjana, Jay Steven M.
bioRxiv | 2022 Jun 17
Carcinoma-associated fibroblasts release microRNA-331-3p containing extracellular vesicles to exacerbate the development of pancreatic cancer via the SCARA5-FAK axis
Yadong Han, Xu Qian, Yang Shi
Cancer Biology & Therapy | 2022 May 05 | PubMed ID: 35510828
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