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2X One-Step RT-PCR Master Mix
2X One-Step RT-PCR Master Mix是一种即用型溶液,含有 RT-PCR 扩增 RNA 模板所需的成分。混合液包括 M-MuLV 逆转录酶、Taq DNA 聚合酶、dNTPs、反应缓冲液、MgCl2、KCl 和 PCR 增强剂/稳定剂。用户只需向主混合物中加入模板、引物组和水,就能完成 RT-PCR 反应。这种方便的 2X 一步式 RT-PCR 主混合物缩短了建立 PCR 反应所需的时间,降低了污染的可能性,尤其是在准备大量反应时。经过优化的混合母液可以对 RNA 模板进行强力扩增,并获得高产率的 PCR 产物。
Taq DNA 聚合酶是一种高恒温 DNA 聚合酶,具有 5´→ 3´ 聚合酶活性和极低的 5´→ 3´ 外切酶活性。2X One-Step RT-PCR Master Mix中的 Taq 源自大肠杆菌菌株,该菌株克隆了来自水生热菌 YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因。M-MuLV 逆转录酶是一种 RNA 引导的 DNA 聚合酶,它能以 RNA(cDNA 合成)或单链 DNA 为模板,从引物开始合成互补 DNA 链。2X One-Step RT-PCR Master Mix所含反转录酶的来源是带有克隆的 M-MuLV 反转录酶基因的大肠杆菌菌株。
图 1. 成功扩增不同大小的扩增子。在 RT-PCR 反应中使用2X One-Step RT-PCR Master Mix扩增了多个不同的扩增子。第 1 和第 2 行对应的是大肠杆菌 16s rRNA 基因(大扩增子),大小为 1.5 kb。第 3 和第 4 染色层对应大肠杆菌 16s rRNA 基因(小扩增片段),大小为 550 bp。第 5 和第 6 行对应的是人类 S15 基因,大小为 360 bp。第 7 和第 8 行对应的是人类 5S rRNA 基因,大小为 120 bp。2X One-Step RT-PCR Master Mix能够以高灵敏度和高产率扩增所有不同大小的产物。
图 2. 从不同数量的 RNA 输入中进行稳健扩增。使用2X One-Step RT-PCR Master Mix从使用我们的总RNA纯化试剂盒分离的 HeLa 总 RNA 稀释系列中扩增人 S15 转录本。361 bp 的扩增片段从 ng 到 fg 范围内的各种 RNA 输入中都得到了稳健扩增。
2X One-Step RT-PCR Master Mix具有如下优势和特性:
- 方便的即用型解决方案
- 灵敏度高、产量大
- 强大的扩增能力
- 有 3 种方便的规格 100、200 和 500 个反应(体积为 20 µL)
- 本产品也是推荐与我们的COVID-19引物和探针溶液以及 COVID-19 阳性对照一起使用的附加产品
产品组分
内容 |
型号 |
规格 |
储存温度 |
2X One-Step RT-PCR Master Mix | 28113 | 100次 | -20ºC |
2X One-Step RT-PCR Master Mix | 28114 | 200次 | -20ºC |
2X One-Step RT-PCR Master Mix | 28115 | 500次 | -20ºC |
操作手册 |
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常温 |
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