您好,欢迎光临艾维缔科技怀来有限公司官方网站!

热线:0313-5935521

搜索
搜索
您现在的位置:
首页
/
/
/
/
EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)
0
ivdshowr

EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)

EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)具有Cap 1结构的萤火虫荧光素酶mRNA,使用5-moUTP修饰,提供更高的转录效率并抑制RNA介导的先天免疫激活。
ivdshowr
产品描述
产品组分
文件资源
营销中心
注意事项
FAQ
文献追踪

产品简介

EZ Cap 萤火虫荧光素酶mRNA(5-moUTP)一旦进入细胞后将表达萤火虫荧光素酶蛋白,它最初从萤火虫Photinus pyralis中提取。该酶ATP依赖性地催化D-荧光素氧化,在约560nm波长下产生化学发光。萤火虫荧光素酶是一种常用的生物发光报告基因,常用于基因调控和功能研究。它适用于mRNA运送, 翻译效率,细胞活力和体内成像等实验。

EZ Cap 萤火虫荧光素酶mRNA(5-moUTP)以1mg / ml的浓度提供。它使用EZ Cap Reagent AG(3'OMe)(货号:B8178)以共转录的方式加帽,以较高效率获得具有Cap 1结构的mRNA。相比于Cap 0结构(ARCA和mCap加帽),带有Cap 1结构的mRNA对于哺乳动物系统更适合,并且具有更高的转录效率。 EZ Cap Reagent AG(3'OMe)获得仅以正确方向插入的能力,导致形成mRNA相较于使用EZ Cap Reagent AG的mRNA具有两倍的翻译效率。添加5-moUTP和poly(A)尾可抑制RNA介导的先天免疫激活,并在体外和体内增强mRNA的稳定性和寿命。 Poly(A)尾在提高翻译起始效率方面也起着重要作用。

产品的所有修饰都旨在模拟完全加工成熟的mRNA。EZ Cap 萤火虫荧光素酶mRNA(5-moUTP)是观察mRNA运送,翻译和其他行为的理想产品。

mRNA Length 1921 nucleotides    
Concentration 1 mg/mL
Buffer 1 mM Sodium Citrate, pH 6.4 Storage -40°C or below
General tips 请将其于冰上溶解,并小心防止RNase污染降解。 尽可能避免反复冻融。 不要涡旋震荡。 首次使用时,将其轻柔离心并分成几份,可供单独使用。 使用不含RNase的试剂和耗材,使用适当的无RNase技术。 直至与转染试剂混合,才可加入含有血清的培养基中。
Shipping Condition 干冰运输。

产品组分

组分内容

型号

规格

储存温度

EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP) R1013-01 100 ug(1mg/ml) -40
EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP) R1013-02 1 mg(1mg/ml) -40
EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP) R1013-03 5 mg(1mg/ml) -40

说明书

1份 1份

室温

*注意:使用各溶液之前,将溶液离心至管底

文件资源

文件下载 文件内容 资源说明
R1013-EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP) 操作手册
R1013-EZ Cap Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)相关说明 宣传单页

营销中心

注意事项

保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。
警告 一般仅供科研使用,请勿用于临床与诊断。

 

FAQ

1. 阳性对照反应

1. 用HyperScribeTM T7 High Yield RNA Synthesis Kit试剂盒转录2μL EGFP对照组模板,不要在转录反应中加入放射性标记的UTP示踪剂。

2. 按照T7 RNA合成试剂盒的中的方法,用DNase I处理转录本。

3. 根据第3部分的方法给转录本加poly(A)尾,但额外加入[α-32P] ATP(任何特异性都可以用);通过跟踪放射性标签,可以更容易地检测出在终反应中有多少ATP结合到poly(A)尾中;记得在向反应混合液加入E-PAP之前吸取留样,作为无酶反应体系(阴性对照)。

4. 通过TCA沉淀法检测结合的带标记的RNA。(成功的加尾反应结合至少50%的放射性标签

5. 取0.5μl的阳性对照反应液及相应的无酶反应液进行电泳(用2.5%的甲醛-琼脂糖凝胶),同时用RNA markers。

加poly(A)尾的产物其电泳条带应该比无酶反应产物的条带大至少150碱基

2. 凝胶中无RNA可见

1. 转录反应的问题

参考T7 RNA合成试剂盒(HyperScribeTM T7 High Yield RNA Synthesis Kit)方法的注意事项。

2. RNase污染

用RNaseZap® Solution处理所有设备及凝胶盒等,并用RNase-free的管子和试剂。

3. 加尾反应后的产物RNA与未加尾的没有可见的大小区别(在凝胶中)

1. 通过阳性对照反应检查试剂盒的组分

验证阳性对照反应结合了至少50%的放射性标记的ATP。

2.如果阳性对照没问题,但实验组的转录本出现问题

凝胶分辨率不足

如果实验组转录本有几Kb大小,琼脂糖凝胶的分辨率可能不足以分辨尺寸的变化。用标签示踪法检测反应(见下部分)

标签示踪法

如果阳性对照反应的产物比无酶反应产物更大,但实验组不是这样,那么就在加尾反应体系中加入示踪标记,通过TCA沉淀法测量结合的标记。

如果结合的标记少于50%, 但放射性标签的掺入大于背景,增加酶的用量或ATP的浓度可能实现理想长度poly (A)加尾的生成。

推荐产品

 北京中农鑫伟农业工程技术有限公司
0
友情链接:

免责申明:本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或者科研等非医疗目的。(获得国家相关部门批准的产品除外)

版权所有:艾维缔科技怀来有限公司 备案号:冀ICP备20011415号