IKKβ（Inhibitor Of Nuclear Factor Kappa B Kinase Subunit Beta），又称 IKBKB、I-Kappa-B-Kinase 2、IKK-Beta 和 NFKBIKB，是一种丝氨酸激酶，在 NF-kappa-B 信号通路中发挥着重要作用，该通路会被多种刺激物激活，如炎症细胞因子、细菌或病毒产物、DNA 损伤或其他细胞应激。在 NF-kappa-B 激活的常规途径中，它是典型 IKK 复合物的一部分，并在 2 个关键丝氨酸残基上磷酸化 NF-kappa-B 抑制剂。这些修饰使抑制剂发生多泛素化，随后被蛋白酶体降解。反过来，游离的 NF-kappa-B 被转运到细胞核中，激活数百个涉及免疫反应、生长控制或防止细胞凋亡的基因的转录。除了 NF-kappa-B 抑制剂外，IKKβ 还能磷酸化信号通路的其他几种成分，包括 NEMO/IKBKG、NF-kappa-B 亚基 RELA 和 NFKB1，以及 IKK 相关激酶 TBK1 和 IKBKE。IKK 相关激酶的磷酸化可防止炎症介质的过度产生，因为它们对典型 IKK 起着负向调节作用。IKKβ 可使 FOXO3 磷酸化，介导 TNF 依赖性地使这种促凋亡转录因子失活。

重组人 IKKβ 蛋白在杆状病毒表达系统中表达为带有 N 端 FLAG 标记的全长蛋白（登录号 NP_001547.1）。该蛋白的分子量为 87.8 kDa。

重组 IKKβ 蛋白适用于酶动力学研究、抑制剂筛选和选择性分析。

激酶活性测定条件： 在含有 1×Enzymatic Buffer、2 mM MgCl2、1 mM DTT 和 100 µM ATP 的 10 µl 反应体系中，将 1 µM STK S3 底物与不同浓度的 IKKβ 蛋白孵育 1 小时。然后加入 10 µl 的检测试剂，包括抗 STK 抗体和 SA-XL665，每种试剂都用 1× 检测缓冲液以 1:100 稀释，并与反应物一起孵育 1 小时。所有操作和反应均在室温下进行，并使用 HTRF KinASE STK 检测法检测酶活性。

重组 IKK&beta 蛋白凝胶。7.5% SDS-PAGE 考马斯蓝染色。分子量：87.8 kDa。纯度：≥ 60%。

IKKβ 活性的 HTRF 分析。在含有 1×Enzymatic Buffer、2 mM MgCl2、1 mM DTT 和 100 µM ATP 的 10 µl 反应体系中，将 1 µM STK S3 底物与不同浓度的 IKKβ 蛋白孵育 1 小时。加入检测试剂并与反应物一起孵育 1 小时。所有操作和反应均在室温下进行，并使用 HTRF KinASE STK 检测法检测酶活性。

IKKβ 活性的 HTRF 分析。在含有 1×Enzymatic Buffer、2 mM MgCl2、1 mM DTT 和 100 µM ATP 的 10 µl 反应体系中，将 1 µM STK S3 底物与不同浓度的 IKKβ 蛋白孵育 1 小时。加入检测试剂并与反应物一起孵育 1 小时。所有操作和反应均在室温下进行，并使用 HTRF KinASE STK 检测法检测酶活性。