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重组AMPK复合体(A1+B1+G2)蛋白
AMPK 是一种能量感应蛋白激酶,在调节细胞能量代谢方面发挥着关键作用。在细胞内 ATP 水平降低时,AMPK 会激活能量产生途径,抑制能量消耗过程:抑制蛋白质、碳水化合物和脂质的生物合成,以及细胞的生长和增殖。它还通过重塑肌动蛋白细胞骨架来调节细胞的极性;可能是通过间接激活肌球蛋白。AMPK 通过使 ACACA、ACACB、GYS1、HMGCR 和 LIPE 等脂质代谢酶磷酸化和失活来调节脂质合成,并分别通过使乙酰羧化酶(ACACA 和 ACACB)和激素敏感脂肪酶(LIPE)磷酸化来调节脂肪酸和胆固醇的合成。它还通过磷酸化 IRS1、PFKFB2 和 PFKFB3 来调节胰岛素信号和糖酵解。
AMPK 是一种异源三聚体,由α催化亚基(PRKAA1 或 PRKAA2)、非催化β亚基(PRKAB1 或 PRKAB2)和γ亚基(PRKAG1、PRKAG2 或 PRKAG3)组成。Beta 非催化亚基通过其 C 端连接 alpha 和 gamma 亚基,成为 AMPK 复合物组装的支架。γ非催化亚基介导与 AMP、ADP 和 ATP 的结合,从而激活或抑制 AMPK:AMP 结合通过诱导磷酸化和阻止催化亚基的去磷酸化,导致 alpha 催化亚基(PRKAA1 或 PRKAA2)的异位激活。ADP 也会刺激磷酸化,但不会刺激已经磷酸化的催化亚基。ATP 可促进催化亚基去磷酸化,使 AMPK 酶失去活性。
重组 AMPK 复合物(A1+B1+G2)包括带有 N 端 FLAG 标记的全长人 PRKAA1 蛋白(登录号 NP_996790.3)、不带标记的全长人 PRKAB1 蛋白(登录号 NP_006244.2)和不带标记的全长人 PRKAG2 蛋白(登录号 NP_057287.2)。PRKAA1、PRKAB1 和 PRKAG2 的分子量分别为 65.3 kDa、30.4 kDa 和 63.7 kDa。
该产品的生产过程如蛋白质详细信息中所述。在可能的情况下,公司会对重组蛋白进行功能或活性检测。并非每种产品都进行了酶动力学活性测定、抑制剂筛选或其他生物活性测定等附加鉴定。特定产品的所有可用数据均显示在特定批次的技术数据表中。
重组 AMPK 复合物(A1+B1+G2)蛋白。10% SDS-PAGE 考马斯蓝染色。分子量:PRKAA1:65.3 kDa,PRKAB1:30.4,PRKAG2:63.7 kDa。纯度 >80%。
AMPK 复合物(A1+B1+G2)活性的 HTRF 检测。在含有 1×Enzymatic Buffer、5 mM MgCl2、1 mM DTT、50 µM AMP 和 100 µM ATP 的 10 µl 反应体系中,将 1 µM STK S1 底物与不同浓度的 AMPK 复合物(A1+B1+G2)蛋白孵育 1 小时。加入用 1×Detection Buffer 稀释的 10 µl 检测试剂,包括抗 STK 抗体(1:100)和 SA-XL665 (1:100),与反应物一起孵育 30 分钟。所有操作和反应均在室温下进行。采用 HTRF 法进行检测。
AMPK 复合物(A1+B1+G2)活性的 HTRF 检测。在含有 1×Enzymatic Buffer、5 mM MgCl2、1 mM DTT、50 µM AMP 和 100 µM ATP 的 10 µl 反应体系中,将 1 µM STK S1 底物与不同浓度的 AMPK 复合物(A1+B1+G2)蛋白孵育 1 小时。加入用 1×Detection Buffer 稀释的 10 µl 检测试剂,包括抗 STK 抗体(1:100)和 SA-XL665 (1:100),与反应物一起孵育 30 分钟。所有操作和反应均在室温下进行。采用 HTRF 法进行检测。
产品组分
内容 |
型号 |
规格 |
储存温度 |
重组AMPK复合体(A1+B1+G2)蛋白 | 81437 | 20ug | -80°C |
重组AMPK复合体(A1+B1+G2)蛋白 | 81537 | 1mg | -80°C |
操作手册 |
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常温 |
注意事项
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FAQ
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