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m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)
众所周知,在真核生物中,m6A (N6-methyladenosine)是在RNA分子中最常见的和丰富存在的。DNA m6A同样也是在多细胞真核生物包括新杆状线虫和果蝇被鉴定和识别;此外,在更高等的真核生物包括植物,小鼠和人类细胞中也被识别。在DNA复制,转座,转录和细胞的防卫中m6A扮演着非常重要的作用。在人类中,DNA m6A修饰是由复杂METTL3甲基转移酶催化得来并由α-ketoglutarate(a-KG)-和Fe2+-加双氧酶例如:ALKBH5和TET-凝血酶样酶(like enzymes)去除。结果表明在许多生物过程中,如:从发育和新陈代谢到生育,METTL3和 a-KG/Fe2+-dependent加双氧酶扮演着重要角色。在DNA上m6A修饰的全动态和反应的可逆性的化学特性同样可以作为表观遗传的新奇的生物标志物且有重要的生物学意义。 m6A修饰的负调控在人类的肿瘤细胞和组织中,相较于他们正常的对照组,首次发现特征非常明显。在肿瘤中发现 m6A 是最为普遍的一种DNA修饰。除此之外,在肿瘤细胞中,相较于初级细胞/组织包含有相当低量的 DNA m6A (<0.001%),在体外培养的人类细胞(0.03%-0.22%)中发现 m6A 修饰有数百倍的增长。 因此,在基因组水平识别检测m6A DNA甲基化和分布研究可以提前了解生物过程的表观遗传调控,并为疾病的诊断和治疗的提高提供更多有用的信息。作为唯一一款可以在市场上,购买到的商业化产品,可以用来定量检测 m6A DNA甲基化。
基于色谱技术分析的如:HPLC-ECD和LC-MS 在细胞和组织上检测 m6A DNA。然而,这种方法耗时并且通量低,成本高。为了解决这些问题,IVDSHOW为您提供了 m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)这款试剂盒采用独特步骤可以直接从细胞/组织等各种样本中提取好的DNA,来定量检测 m6A DNA甲基化程度。
在mRNA中m6A甲基化是可逆的(文献1)
对于细胞与组织等样本,m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法) 具有以下优势特:
- 类似于Elisa步骤的比色法检测方便快速。整个操作步骤可在3小时45分钟完成;荧光法更短。 类似于Elisa步骤的比色法检测方便快速。整个操作步骤可在3小时45分钟完成;荧光法更短。
- 高敏,检测的最低下限为 5 pg 的 m6A;荧光法更灵敏 。
- 96孔可拆卸板模式使研究人员能根据自己需要选择手工或是高通量模式分析。
- 操作简便、可信、分析条件始终如一。
- 独特的结合液容许>100 nts 的DNA紧紧的结合在条孔上,可以定量检测未损伤的完整的DNA和片段化的DNA比如:碎片DNA(ChIPed DNA)。
- 优化的抗体和增强剂溶液配方可更好更特异的定量检测m6A,对于特定片段腺苷浓度范围的未甲基化样本DNA不会产生交叉反应。
- 包括通用型的阴性和阳性对照,对于来自任何种属的m6A都可以实现定量检测。
产品组分
组分内容 |
型号:A-P-9010-48(48次) |
型号:A-P-9010-96(96次) |
储存温度 |
|
WB |
10X Wash Buffer |
14 ml |
28 ml |
4°C |
BS |
Binding Solution |
5 ml | 10 ml | 室温 |
NDC |
Negative DNA Control,100ug/ml * |
10 ul |
20 ul |
-20°C |
PC |
Positive Control,200ug/ml m6A,1ug/ml * |
10 ul |
20 ul |
-20°C |
CA |
Capature Antibody,1000X* |
5 ul | 10 ul | 4°C |
DA |
Detection Antibody,1000X* |
6 ul | 12 ul | -20°C |
ES |
Enhancer Solution |
5 ul | 10 ul | -20°C |
DS |
Developer Solution |
5 ml | 10 ml | 4°C |
SS |
Stop Solution |
5 ml |
10 ml |
室温 |
8-联管 |
8-Well Assay Strips(With Frame) |
6 |
12 |
4°C |
操作手册 |
|
1 |
1 |
室温 |
文件资源
文件下载 | 文件内容 | 资源说明 |
![]() |
A-P-9010-m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法) | 操作手册 |
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A-P-9010-m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)相关说明 | 宣传单页 |
注意事项
保存建议 | 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存各组分。 |
警告 | 本品仅供科研使用,请勿用于临床与诊断。 |
FAQ
Q:其中试剂组分:binding Solutions在 m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)【A-P-9010】与m6A RNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)【A-P-9005】中是否一样呢?
A:是的。
Q:可以采用m6A RNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)【A-P-9005】中的阳性对照(m6A RNA)替代m6A DNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)【A-P-9010】中的阳性对照(m6A DNA)吗?
A: 因为浓度不同,所以A-P-9005中的阳性对照不能用于A-P-9010。
Q:砷在处理样品中会干扰甲基化检测吗?
A:砷不会影响甲基化的检测。
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D'Aquila P et. al. (May 2023). Epigenetic-Based Regulation of Transcriptome in Escherichia coli Adaptive Antibiotic Resistance. Microbiol Spectr. :e0458322.
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Ouyang L et. al. (May 2021). ALKBH1-demethylated DNA N6-methyladenine modification triggers vascular calcification via osteogenic reprogramming in chronic kidney disease. J Clin Invest.
Wu L et. al. (December 2019). Association of N<sup>6</sup>-methyladenine DNA with plaque progression in atherosclerosis via myocardial infarction-associated transcripts. Cell Death Dis. 10(12):909.
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