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与泛素（Ub）共价连接是调节蛋白质稳定性、功能和定位的主要翻译后修饰之一。泛素化是三种酶的协同作用：Ub 激活酶（E1）、Ub 连接酶（E2）和 Ub 连接酶（E3）。泛素化的特异性和效率主要由 E3 酶决定，它通过与 E2∼Ub 共轭物和底物蛋白质结合来指导 Ub 结合级联的最后一步。这一步确保了 Ub 从 E2∼Ub 转移到底物上，导致其单泛素化或多泛素化。
人类小鼠双分 2 同源物（MDM2）是一种 E3 Ub 连接酶，也是肿瘤抑制蛋白（如 p53）的主要调节因子。因此，高活性的 MDM2 可通过靶向肿瘤抑制蛋白进行蛋白酶体降解来促进肿瘤的形成，使癌细胞得以存活和增殖。因此，MDM2 是癌症免疫疗法中一个极具吸引力的潜在药物靶点。与大多数 E3 连接酶一样，MDM2 自身也会泛素化，这种自身泛素化会刺激 MDM2 Ub 连接酶的活性。
图 1.MDM2链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒示意图
MDM2链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒是一种灵敏的高通量筛选（HTS）TR-FRET 分析试剂盒，设计用于在均相 384 反应中测量 MDM2 自动泛素化活性。它利用铕隐色酸酯标记的 Ub（供体）和 Cy5 标记的 Ub（受体）来完成 TR-FRET 配对。由于 TR-FRET 供体和受体都结合到了 MDM2 上形成的多泛素链中，这种基于 FRET 的检测无需耗时的洗涤步骤，因此特别适用于 HTS 应用以及多泛素化的实时动力学分析。
甲基化泛素抑制 MDM2 自身泛素化。
UniProt #
UBE1: P22314; UBCH5b: P62837; MDM2: Q00987
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产品组分
内容 型号 规格 储存温度
MDM2链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒
CN78302-01 384次 -20°C MDM2链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒
CN78302-02 768次 -20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
1. Wienken, M. et al., J. Mol. Cell Biol. 2017; 9(1): 74-80.
2. Shaikh, M.F. et al., Ann. Clin. Lab. Sci. 2016; 46(6): 627-34.
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