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HSP90α羧基端域时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒
HSP90(热休克蛋白 90 kDa)是 HSP 蛋白家族的成员。HSP 蛋白是伴侣蛋白,通过作用于激素受体和激酶、细胞骨架组织、CDK4(细胞周期蛋白依赖性激酶 4)、Wee1 和 CDK11p110 等,参与协助蛋白质正确折叠和抵抗热相关应激、细胞信号传递、细胞周期和分化等。HSP90 有 3 个家族成员,它们在细胞定位方面各不相同。HSP90A 是一种细胞膜蛋白,有两种诱导型异构体(HSP90α1 和 α2)和一种组成型表达型异构体(HSP90β)。HSP90B(内质网蛋白)存在于内质网中,TRAP(TNF 受体相关蛋白 1)存在于线粒体中。它们由四个结构域组成: 它们由四个结构域组成:N 端结构域(NTD)、连接蛋白、中间结构域(MD)和 C 端结构域(CTD)。NTD 有一个高亲和力 ATP 结合位点,而 CTD 主要参与目标结合、二聚化和定位。HSP90α 受转录水平、高温诱导、翻译后修饰(如磷酸化)以及辅助伴侣素的调控。HSP90 可参与稳定多种癌基因以及参与血管生成、炎症、肿瘤抑制和转移的蛋白质,从而导致癌症进展。因此,HSP90 已成为癌症疗法中一个极具吸引力的治疗靶点。除癌症外,HSP90 还可在阿尔茨海默病、帕金森病和病毒感染中发挥作用。
HSP90α(C-末端结构域)TR-FRET 检测试剂盒旨在利用 TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)检测 HSP90α(热休克蛋白 90 kDa alpha)与其靶 PPID(肽基脯氨酰异构酶 D)的结合活性,用于筛选和分析应用。它利用铽标记的供体和染料标记的受体完成 TR-FRET 配对。HSP90α(C-末端结构域)TR-FRET 检测试剂盒为 384 孔规格,内含足够的纯化 HSP90α(C-末端结构域)氨基酸 535-732)、PPID、铽标记的供体和染料标记的受体以及 384 个反应所需的检测缓冲液,使用方便。
图 1:HSP90α羧基端域时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒检测原理示意图。
将含有铽标记供体、染料标记受体、HSP90α(C 端)、PPID 和抑制剂的样品进行孵育。然后用荧光阅读器测量荧光强度。在 HSP90α (C-Terminal) 与 PPID 结合的情况下,由于供体和受体的接近,会发生能量转移。结合中断会导致能量传递减少。λ=665 nm 处的荧光强度直接对应于 HSP90α (C-Terminal) 与 PPID 的结合。
在新生物素存在下,HSP90α(C 端)与 PPID 的结合活性。
UniProt #
P07900
产品组分
内容 | 型号 | 规格 |
储存温度 |
HSP90α羧基端域时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒 | 50289 | 384孔 | -20°C |
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FAQ
References
Allan R.K., et al., 2006 J. Biol. Chem. 281(11): 7161-71.
Hoter A., et al., 2018 Int J Mol Sci. 19(9):2560.
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