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DCAF15链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒
与泛素(Ub)共价连接是调节蛋白质稳定性、功能和定位的主要翻译后修饰之一。泛素化是三种酶的协同作用:Ub 激活酶(E1)、Ub 连接酶(E2)和 Ub 连接酶(E3)。泛素化的特异性和效率主要由 E3 酶决定,它通过与 E2∼Ub 共轭物和底物蛋白质结合来指导 Ub 结合级联的最后一步。这一步可确保 Ub 从 E2∼Ub 转移到底物上,从而实现单泛素化或多泛素化。
DDB1 和 CUL4 相关因子 15(DCAF15)是一种与 CUL4A 或 CUL4B 结合形成具有 E3 连接酶活性的复合物的蛋白质。DCAF15 与主要转录因子 ZEB1 相互作用并泛素化,ZEB1 参与激活转移性癌细胞的上皮-间质转化(EMT)。此外,DCAF15 是 RNA 剪接因子 RBM39 泛素化的必要条件,RBM39 的降解会导致造血和淋巴癌细胞对药物诱导的细胞毒性更加敏感。因此,DCAF15 是一个具有吸引力的潜在癌症治疗药物靶点。与大多数 E3 连接酶一样,DCAF15 自身也会泛素化。
DCAF15 链内 TR-FRET 检测试剂盒是一种灵敏的高通量筛选(HTS)TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)检测试剂盒,设计用于以均质 384 反应格式检测 DCAF15(DDB1 和 CUL4 相关因子 15)的自动泛素化活性。它利用铕标记的泛素(供体)和 Cy5 标记的泛素(受体)来完成 TR-FRET 配对。由于 TR-FRET 供体和受体都与 DCAF15 上形成的多泛素链结合在一起,因此该检测方法可测量多泛素化。作为一种均质测定,它不需要耗时的洗涤步骤,因此特别适用于 HTS 应用和实时动力学分析。
图 1:DCAF15链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒示意图。
甲基化泛素对 DCAF15 自身泛素化的抑制。
UniProt #
UBE1: P22314; UBCH5b: P62837; DCAF15: Q66K64
产品组分
内容 | 型号 | 规格 |
储存温度 |
DCAF15链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒 | 78543 | 384孔 | -20°C |
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