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泛素是一种小的（约8.6千道尔顿）多肽，它可以通过其C端与靶蛋白上赖氨酸残基的氨基相连。这种连接被称为单泛素化。额外的泛素部分可以利用泛素中存在的七个赖氨酸残基中的任何一个与初始泛素相连。这些泛素链的形成被称为多泛素化。这种多泛素化中特征最明确的是通过泛素第48位赖氨酸形成的链（K48连接的链）。单泛素化已被证明会改变靶蛋白的定位、活性和/或功能。多泛素化最常见的后果是蛋白酶体介导的靶蛋白降解。泛素与靶蛋白的连接需要三种不同酶的协同作用，即E1（泛素激活酶）、E2（泛素结合酶）和E3（泛素连接酶），从而在泛素的C端与靶蛋白上赖氨酸残基的ε - 氨基之间形成异肽键。泛素E3连接酶作为支架蛋白，为泛素结合酶（E2）和靶底物提供对接位点。通常，E3连接酶介导泛素从E2硫酯中间体转移到与底物蛋白的酰胺连接（赫什科和奇乔韦尔，1998年）。除了底物的泛素化，E3连接酶也可以对自身进行 “自泛素化”。这一特性在体外测定中用于监测E3连接酶的活性。这种基于凝胶的体外泛素化试剂盒设计得简单、快速且易于使用。E3连接酶测定使用荧光标记的泛素 - Alexa647进行，并在SDS - PAGE上分离，使研究人员能够直接观察和定量分析凝胶，节省了宝贵的时间和试剂。该测定试剂盒避免了更费力、耗时的基于蛋白质免疫印迹的E3测定方法。
这种基于凝胶的体外泛素化试剂盒设计得简单又快速。E3连接酶检测使用荧光标记的泛素-Alexa647进行，并在SDS-PAGE上分离，使研究人员能够直接观察和量化凝胶，节省了宝贵的时间和试剂。该检测试剂盒避免了基于蛋白质免疫印迹法的E3检测中更为繁琐耗时的步骤。
凝胶可定制体外E3连接酶活性检测试剂盒(VU1-HRP)具有如下优势和特性：
- 泛素E2结合或E3连接酶活性的定量分析
- 新型E2或E3活性的展示
- 连接酶活性拮抗剂或激动剂的高通量筛选（HTS）
- 在纯化过程中监测酶活性
- 在溶液相中监测E3活性，可选择您需要的E2
- 板式检测方法适用于高通量筛选（HTS）
- 检测系统为E3连接酶活性提供可靠的读数
- E3LITE检测法采用非放射性报告底物
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产品组分
组分内容
型号
规格
储存温度
凝胶可定制体外E3连接酶活性检测试剂盒(VU1-HRP)
UC202-01 96次 室温 凝胶可定制体外E3连接酶活性检测试剂盒(VU1-HRP)
UC202-02 384次 室温 操作手册 1
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常温
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