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我们的线粒体膜电位橙色荧光检测试剂盒(适合微孔板)是一套用于监测细胞功能的工具。可以使用多种参数。这种特定的试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位（MMP）的丧失来检测细胞凋亡。线粒体膜电位的崩溃与线粒体通透性转换孔的开放同时发生，导致细胞色素C释放到细胞质中，进而引发细胞凋亡级联反应中的其他下游事件。这种荧光检测法使用我们专有的阳离子型MitoLite™ Orange来检测细胞中的线粒体膜电位变化。在正常细胞中，当MitoLite™ Orange在线粒体中积累时，橙色荧光强度会增加。然而，在凋亡细胞中，随着MMP的崩溃，MitoLite™ Orange的荧光强度会降低。用MitoLite™ Orange染色的细胞可以通过荧光法进行监测。我们的线粒体膜电位橙色荧光检测试剂盒(适合微孔板)提供了所有必需的组分以及优化的检测方法。该试剂盒可用于筛选细胞凋亡的激活剂和抑制剂。并且该检测可以在方便的96孔和384孔荧光微量滴定板中进行，无需洗涤步骤。
产品优势
1.高特异性：依赖于线粒体膜电位（ΔΨm）选择性积聚在活性线粒体中
2.细胞兼容性：适用于增殖细胞、非增殖细胞，兼容悬浮细胞和贴壁细胞的检测。
3.稳定性好：抗光漂白能力强，适合长时间活细胞成像
4.高信噪比：和其他染料相比，信噪比更高，成像更清晰
样品实验方案
简要概述
1.准备细胞
2.加入待测化合物
3. 加入MitoTell™ Orange工作液：96孔板：100 µL/孔； 384孔板：25 µL/孔；
4. 37°C、5% CO₂培养箱中孵育15 - 30分钟
5. 加入Assay Buffer B： 96孔板：50 µL/孔； 384孔板：12.5 µL/孔；
6.用荧光酶标仪检测（底读模式）： 激发/发射波长：540/590 nm； 截止波长：570 nm
（实验前需将所有试剂组分于室温解冻，确保完全溶解并混匀后再使用。）
工作液配制方法
将50 µL 200× MitoTell™ Orange（组分A）加入10 mL Assay Buffer A（组分B）中，充分混匀后即配制成MitoTell™ Orange工作液，需避光保存。细胞样本制备指南：More
实验步骤
1.使用待测化合物处理细胞至预定时间以诱导凋亡，并同步设立平行对照实验
阴性对照：仅用载体处理细胞。
阳性对照：在37°C 5％CO2培养箱中，以5-50 µM的浓度用FCCP或CCCP处理细胞15至30分钟。
注意：CCCP或FCCP可以与MitoTell Orange同时添加。 为了获得结果，可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。
2.移除细胞培养基。
注意：在添加MitoTell Orange工作溶液之前，必须除去细胞培养基。
3..向96孔板每孔加入100 µL MitoTell™ Orange工作液（384孔板每孔25 µL）。
4.将培养板在5%的CO2、37°C的培养箱中避光孵育15-30分钟
注：具体孵育时间需根据细胞类型及浓度优化，建议实验前进行条件摸索
5.向96孔板每孔加入50 µL Assay Buffer B（组分C）（384孔板12.5 µL/孔）。
注：加样后切勿洗涤细胞；悬浮细胞需在加入缓冲液后以800 rpm离心2分钟，然后制动。
6.在加入Assay Buffer B（组分C）后10-30分钟内，使用荧光酶标仪（底读模式，激发/发射=540/590 nm，截止波长570 nm）监测荧光强度，可以使用终点模式，也可以使用动力学模式。
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产品组分
组分内容
型号
规格
储存温度
线粒体膜电位橙色荧光检测试剂盒(适合微孔板)
22805 500次 室温 操作手册 1
1
常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存各组分。 -
FAQ
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Activation of eIF2$\alpha$-ATF4 by endoplasmic reticulum-mitochondria coupling stress enhances COX2 expression and MSC-based therapy for rheumatoid arthritis
Authors: Liu, Jiaqing and Zhang, Xing and Zhao, Xiangge and Ren, Jinyi and Huang, Huina and Zhang, Cheng and Chen, Xianmei and Li, Weiping and Wei, Jing and others,
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