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我们的磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒(蓝色荧光)是一套用于监测细胞活力的工具。有多种参数可用于监测细胞活力。这款特定的试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的易位来监测细胞凋亡。在细胞凋亡过程中,PS转移到质膜的外层。细胞表面磷脂酰丝氨酸的出现是细胞凋亡初始/中期阶段的通用指标,并且可以在观察到形态变化之前检测到。本试剂盒中使用的我们专利的Apopxin™ PS传感器是基于小分子的PS传感器。该PS传感器与膜上的PS结合后会发出蓝色荧光。试剂盒中使用的PS染色剂具有与Pacific Blue®(Pacific Blue®是Invitrogen的商标)相似的光谱特性。这种蓝色荧光染色剂可被405纳米的紫光激光很好地激发,并在约450纳米处发射强烈的蓝色荧光。该试剂盒经过优化,可与配备紫光激光的流式细胞仪配合使用。它特别适用于细胞的多色流式细胞术分析。该试剂盒已与荧光抗体结合用于多色应用中的细胞流式细胞术分析。
样品实验方案
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本(200 µL/样本)
2.加入Apopxin Violet 450检测溶液
3.室温避光孵育30-60分钟
4.使用配备450/40 nm滤光片(Pacific Blue通道)的流式细胞仪或 Violet滤光片的荧光显微镜分析细胞。
重要提示:实验前需将100X碘化丙啶(组分C)于室温解冻。
实验操作流程
1.使用测试化合物处理细胞(如:Jurkat细胞用喜树碱处理4-6小时)以诱导细胞凋亡。
注意:贴壁细胞因收获过程可能损伤膜结构,常规不建议流式检测。但Casiola-Rosen和van Engelend等已建立相关方法
2.离心收集细胞,得到1-5×105个细胞/管。
3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。
4.将2μLApopxin Violet 450(组分A)加入细胞中。
(可选步骤)加入2 µL 100X碘化丙啶(组分C)标记坏死细胞。
5.室温避光孵育30至60分钟。
可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300μL的测定缓冲液(组分B)以增加体积。
6.使用配备450/40 nm滤光片(Pacific Blue通道)的流式细胞仪或 Violet滤光片的荧光显微镜分析细胞。
流式细胞仪分析方案
凋亡检测
使用450/40 nm滤光片(Pacific Blue通道)定量Apopxin™ Violet 450结合情况
细胞活力检测
添加碘化丙啶后通过610/20 nm滤光片(PE-Texas Red通道)分析
注:贴壁细胞因收获过程可能损伤膜结构,常规不建议流式检测。但Casiola-Rosen等学者已建立相关方法
荧光显微镜分析方案
1.吸取孵育后的细胞悬液,用检测缓冲液洗涤1-2次,随后用检测缓冲液重新悬浮细胞。
2.将细胞悬液加至带有盖玻片的载玻片上。
*注:对于贴壁细胞,建议直接在盖玻片上培养。完成Apopxin™ Violet 450孵育后,用检测缓冲液洗涤1-2次,重新加入检测缓冲液覆盖盖玻片,倒置后观察。也可选择用2%甲醛固定细胞后镜检。*3.使用紫光滤光片(Violet filter)观察Apopxin™ Violet 450标记的凋亡细胞。
当加入碘化丙啶时,通过TRITC滤光片检测细胞活性。细胞膜表面的蓝色荧光表明Apopxin™ Violet 450与细胞表面PS的结合。
关键词:- 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒(蓝色荧光)
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产品组分
组分内容
型号
规格
储存温度
磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒(蓝色荧光)
22835 100次 室温 操作手册 1
1
常温
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注意事项
保存建议 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存各组分。 -
FAQ

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STE20-Type Kinases MST3 and MST4 Act Non-Redundantly to Promote the Progression of Hepatocellular Carcinoma
Authors: Caputo, Mara and Xia, Ying and Anand, Sumit Kumar and Cansby, Emmelie and Andersson, Emma and Marschall, Hanns-Ulrich and K{\"o}nigsrainer, Alfred and Peter, Andreas and Mahlapuu, Margit
Journal: (2023)The Growth, Apoptosis and Oxidative Stress in Microcystis viridis Exposed to Glyphosate
Authors: Ye, Jing and Huang, Chen and Qiu, Zhihao and Wu, Liang and Xu, Chao
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Authors: Su, Yifan and Tian, Hua and Wei, Lijiang and Fu, Guohui and Sun, Ting
Journal: Acta Biochimica et Biophysica Sinica (2018): 658--665Integrin β3 inhibits hypoxia-induced apoptosis in cardiomyocytes
Authors: Su, Yifan and Tian, Hua and Wei, Lijiang and Fu, Guohui and Sun, Ting
Journal: Acta Biochimica et Biophysica Sinica (2018)
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