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CRISPR/Cas9极速检测试剂盒(比色法)是一套完整的优化试剂组合,专为使用纯化的 Cas9 核酸酶或从不同物种的组织和培养细胞中分离的全细胞提取物,对 CRISPR 相关蛋白 9(Cas9 和 dCas9:酿脓链球菌)的含量进行定量检测而设计。
成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)和CRISPR相关蛋白9核酸酶(Cas9)最初在细菌中被发现,是一种抵御外源DNA的防御机制,如今已成为基因编辑和基因组工程中靶向修饰基因序列的重要工具。CRISPR/Cas9系统通过将RNA引导的Cas9核酸酶和合适的向导RNA(gRNA)递送至细胞内,实现对目标基因组位点的序列特异性切割。成功的Cas9结合还需要紧邻特异性序列后的原间隔序列邻近基序(PAM)序列。检测转染细胞中Cas9编辑蛋白的水平,有助于评估转染效率并优化整个细胞群体的编辑过程。蛋白质印迹等传统方法需要电泳和转膜步骤,不仅耗时较长,也不适用于高通量分析。为满足这一需求,我们研发了CRISPR/Cas9极速检测试剂盒(比色法),可便捷地对Cas9蛋白进行定量检测。
CRISPR/Cas9极速检测试剂盒(比色法)用于检测全细胞提取物中的Cas9水平,或检测来自各类细胞与组织的纯化Cas9蛋白。在本检测方法中,样本中的Cas9蛋白会紧密且稳定地结合至酶标板条。结合的Cas9蛋白会先被检测抗体识别,随后加入显色试剂进行显色反应。Cas9的含量与测得的吸光度强度成正比,可通过与Cas9蛋白标准品对比实现定量检测。
输入材料可为纯化的 Cas9 核酸酶或全细胞提取物。每次实验的全细胞提取物用量范围为 0.5 至 5 微克,最佳用量范围为 1 至 2 微克。纯化蛋白的用量范围为 1 至 100 纳克,根据蛋白纯度不同,最佳用量范围为 20 至 50 纳克。输入材料的总体积不得超过 4 微升。
CRISPR/Cas9极速检测试剂盒(比色法)具有以下优势特:
- 快速:操作流程快捷高效,可在1小时内完成
- 灵敏度:高灵敏度和高特异性。在全细胞提取物的指定用量范围内,检测限低至1纳克/孔,动态范围为2-50纳克/孔。仅识别化脓链球菌Cas9(SpCas9)和dCas9。
- 便捷性: 试剂盒附带对照品,可方便地对 Cas9 含量进行定量分析
- 灵活: 条状微孔板格式使检测方法具备灵活性:可手动操作或实现高通量检测
- 可靠: 检测条件简单、可靠且稳定一致
关键词:- CRISPR/Cas9极速检测试剂盒(比色法)
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产品组分
组分内容
型号:A-P-7104-96(96次)
型号:A-P-7104-192(192次) 储存温度
WB
10X Wash Buffer
14 ml
28 ml
4°C HBS
High Binding Solution
10 ml 20 ml 室温 C9S
Cas9 Protein Standard,50ug/mL*
20 ul
40 ul
-20°C CDA
Cas9 Detection Antibody,1000ug/mL*
8 ul
16 ul
4°C MSI
M-Signal Indicator*
16 ul 32 ul -20°C ES
Enhancer Solution*
10 ul 20 ul -20°C DS
Developer Solution
10 ml 20 ml 4°C SS
Stop Solution
10 ml
20 ml
室温 8-联管
8-Well Assay Strips(With Frame)
12条
24条
4°C 操作手册
1
1 室温
*注意:为了最大程度使用产品,在使用各溶液之前,将溶液离心至管底。
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文件资源
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注意事项
保存建议 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存各组分。 警告 本品仅供科研使用,请勿用于临床与诊断。 -
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