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尿液样本m6A定量检测试剂盒(比色法)
众所周知,在真核生物中,m6A (N6-methyladenosine)是在RNA分子中最常见的和丰富存在的。这种修饰是由m6A催化甲基转移酶复杂METTL3和最近发的m6A RNA 去甲基转移酶如FTO和ALKBH5,这种 m6A RNA去甲基是以α-ketoglutarate m6A(α-KG)-和Fe2+-方式进行的。 结果表明, 在许多生物过程中,如从生命发展和代谢生育,METTL3,FTO和ALKBH5扮演着重要角色。超过80%的m6A是以RNA 甲基化的形式存在于不同的物种。 m6A主要分布在mRNA和也发生在非编码RNA(ncRNA)如tRNA,rRNA和snRNA。相对丰富的m6A在mRNA转录时已经表明影响核糖核酸代谢过程,如拼接,核出口,翻译能力和稳定性,RNA转录。异常甲基化水平的m6A诱导缺陷甲基化酶和m6A RNA去甲基酶可能导致RNA功能障碍的和疾病发生。例如,异常低水平在正常m6A目标由于增加患者FTO活动、FTO基因突变,通过迄今还未通路,导致了肥胖和相关疾病的发作。动态和可逆化学m6A修饰,在RNA中也可以作为一种新颖的表观遗传标记的生物学,意义深远可以预见。因此,更多的有用的信息,更好理解m6A RNA甲基化水平和分布对RNA转录、诊断和治疗疾病非常有益。 该产品中,总RNA必将结合在微孔板上,使用一种高特异性的RNA溶液方案。使用特异性较强的捕获抗体和检测抗体来分析m6A。检测产生的增强信号,然后通过读取在微型板分光光度计波长为450 nm处吸光度进行比色定量。m6A的数量与测量的OD值强度是成正比的。在这个试剂盒中包括阳性和阴性对照。绘制标准曲线 (范围:0.02到1 ng的m6A)或单点对照的m6A可以用作阳性对照。因为m6A的含量,在不同的组织,正常和病变的部位,或在处理过以及未处理的条件下,我们建议运行2份样品,以确保信号生成的可信心性。这套解决方案将允许研究人员选择定量一种数量的m6A或确定相对m6A RNA甲基化状态的两个不同的RNA样品。 该款产品拥有一套完整的优化缓冲液和试剂体系,可以采用比色或荧光法来定量总RNA中的 m6A (N6-methyladenosine)。对于总RNA(从哺乳动物,各种组织或细胞样本如像培养瓶和培养皿培养的细胞,新鲜和冷冻的组织,石蜡包埋组织,血液,体液,植物,真菌,细菌和病毒等任何样本中提取的) 中m6A直接定量检测甲基化状态是非常理想的。
在mRNA中m6A甲基化是可逆的(文献1)
对于细胞与组织等样本,尿液 m6A 定量检测试剂盒(比色法) 具有以下优势特:
- 时间短:创新的比色分析,方便和快速。整个操作步骤可在 4 小时内完成;
- 高通量:96 条状微孔设计使得分析更灵活:方便手动或高通量分析;
- 稳定性:创新的试剂盒成分,使得背景信号极其低,减少封闭板子的需要量并且使得分析更为简单, 准确、可信和始终如一;
- 可信性:使用本款试剂盒来测量人类尿液中 m6A 水平可与 HPLC 方法检测相媲美;
- 高灵敏:新的分析原理可以实现高灵敏。检测的灵敏度低至 0.01ng/分析孔;
- 样本量少:每孔低输入的体积量范围是:1-20ul 且较佳体积量是:5ul;
- 专一性:特异性的抗体和增强剂溶液容许高特异性的识别 m6A,不会与未甲基化的腺苷酸发生交叉反应;
- 通用型广:包括的阴性和阳性对照,对于自然存在的 m6A 和来自任何种属不同的尿液样本中包含的 DNA/RNA 片段的 m6A,都可以实现定量检测。
产品组分
组分内容 |
型号:A-P-9015-48(48次) |
型号:A-P-9015-96(96次) |
储存温度 |
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WB |
10X Wash Buffer |
14 ml |
28 ml |
4°C |
BS |
Binding Solution |
5 ml | 10 ml | 室温 |
MS | m6A Standard,2ug/ml | 10 ul | 20 ul | -20°C |
NC |
Negative Control,50ug/ml * |
10 ul |
20 ul |
-20°C |
MAS |
m6A Assay Solution,500X * |
10 ul |
20 ul |
-20°C |
CA |
Capature Antibody,1000X* |
5 ul | 10 ul | 4°C |
DA |
Detection Antibody,2000X* |
6 ul | 12 ul | -20°C |
ES |
Enhancer Solution |
5 ul | 10 ul | -20°C |
DS |
Developer Solution |
5 ml | 10 ml | 4°C |
SS |
Stop Solution |
5 ml |
10 ml |
4°C |
P1 |
Plate 1 (Assay Plate ,flat bottom) |
6 |
12 |
4°C |
P2 | Plate 2 (Sample Preparation Plate,round bottom) |
6 |
12 |
室温 |
操作手册 |
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1 |
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室温 |
文件资源
文件下载 | 文件内容 | 资源说明 |
A-P-9015-尿液样本m6A定量检测试剂盒(比色法) | 操作手册 | |
A-P-9015-尿液样本m6A定量检测试剂盒(比色法)相关说明 | 宣传单页 |
注意事项
保存建议 | 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存各组分。 |
警告 | 本品仅供科研使用,请勿用于临床与诊断。 |
FAQ
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