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尿液样本m6A定量检测试剂盒(比色法)
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尿液样本m6A定量检测试剂盒(比色法)

尿液样本m6A定量检测试剂盒(比色法)非常适合从人或动物尿液标本中,来定量检测m6A RNA甲基化的含量,整个实验时间不到4小时。一款无创伤样本的,m6A定量检测试剂盒!检测仪器:酶标仪。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。
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 众所周知,在真核生物中,m6A (N6-methyladenosine)是在RNA分子中最常见的和丰富存在的。这种修饰是由m6A催化甲基转移酶复杂METTL3和最近发的m6A RNA 去甲基转移酶如FTO和ALKBH5,这种 m6A RNA去甲基是以α-ketoglutarate m6A(α-KG)-和Fe2+-方式进行的。 结果表明, 在许多生物过程中,如从生命发展和代谢生育,METTL3,FTO和ALKBH5扮演着重要角色。超过80%的m6A是以RNA 甲基化的形式存在于不同的物种。 m6A主要分布在mRNA和也发生在非编码RNA(ncRNA)如tRNA,rRNA和snRNA。相对丰富的m6A在mRNA转录时已经表明影响核糖核酸代谢过程,如拼接,核出口,翻译能力和稳定性,RNA转录。异常甲基化水平的m6A诱导缺陷甲基化酶和m6A RNA去甲基酶可能导致RNA功能障碍的和疾病发生。例如,异常低水平在正常m6A目标由于增加患者FTO活动、FTO基因突变,通过迄今还未通路,导致了肥胖和相关疾病的发作。动态和可逆化学m6A修饰,在RNA中也可以作为一种新颖的表观遗传标记的生物学,意义深远可以预见。因此,更多的有用的信息,更好理解m6A RNA甲基化水平和分布对RNA转录、诊断和治疗疾病非常有益。 该产品中,总RNA必将结合在微孔板上,使用一种高特异性的RNA溶液方案。使用特异性较强的捕获抗体和检测抗体来分析m6A。检测产生的增强信号,然后通过读取在微型板分光光度计波长为450 nm处吸光度进行比色定量。m6A的数量与测量的OD值强度是成正比的。在这个试剂盒中包括阳性和阴性对照。绘制标准曲线 (范围:0.02到1 ng的m6A)或单点对照的m6A可以用作阳性对照。因为m6A的含量,在不同的组织,正常和病变的部位,或在处理过以及未处理的条件下,我们建议运行2份样品,以确保信号生成的可信心性。这套解决方案将允许研究人员选择定量一种数量的m6A或确定相对m6A RNA甲基化状态的两个不同的RNA样品。 该款产品拥有一套完整的优化缓冲液和试剂体系,可以采用比色或荧光法来定量总RNA中的 m6A (N6-methyladenosine)。对于总RNA(从哺乳动物,各种组织或细胞样本如像培养瓶和培养皿培养的细胞,新鲜和冷冻的组织,石蜡包埋组织,血液,体液,植物,真菌,细菌和病毒等任何样本中提取的) 中m6A直接定量检测甲基化状态是非常理想的。

在mRNA中m6A甲基化是可逆的(文献1)

对于细胞与组织等样本,尿液 m6A 定量检测试剂盒(比色法) 具有以下优势特:

  • 时间短:创新的比色分析,方便和快速。整个操作步骤可在 4 小时内完成;
  • 高通量:96 条状微孔设计使得分析更灵活:方便手动或高通量分析;
  • 稳定性:创新的试剂盒成分,使得背景信号极其低,减少封闭板子的需要量并且使得分析更为简单, 准确、可信和始终如一;
  • 可信性:使用本款试剂盒来测量人类尿液中 m6A 水平可与 HPLC 方法检测相媲美;
  • 高灵敏:新的分析原理可以实现高灵敏。检测的灵敏度低至 0.01ng/分析孔;
  • 样本量少:每孔低输入的体积量范围是:1-20ul 且较佳体积量是:5ul;
  • 专一性:特异性的抗体和增强剂溶液容许高特异性的识别 m6A,不会与未甲基化的腺苷酸发生交叉反应;
  • 通用型广:包括的阴性和阳性对照,对于自然存在的 m6A 和来自任何种属不同的尿液样本中包含的 DNA/RNA 片段的 m6A,都可以实现定量检测。

产品组分

组分内容

型号:A-P-9015-48(48)

型号:A-P-9015-96(96)

储存温度

WB

10X Wash Buffer

14 ml

28 ml

4°C

BS

Binding Solution

5 ml 10 ml 室温
MS m6A Standard,2ug/ml 10 ul 20 ul -20°C

NC

Negative Control,50ug/ml *

10 ul

20 ul

-20°C

MAS

m6A Assay Solution,500X *

10 ul

20 ul

-20°C

CA

Capature Antibody,1000X*

5 ul 10 ul 4°C

DA

Detection Antibody,2000X*

6 ul 12 ul -20°C

ES

Enhancer Solution

5 ul 10 ul -20°C

DS

Developer Solution

5 ml 10 ml 4°C

SS

Stop Solution

5 ml

10 ml

4°C

P1

Plate 1 (Assay Plate ,flat bottom)

6

12

4°C

P2 Plate 2 (Sample Preparation Plate,round bottom)

6

12

室温

操作手册

 

1

1

室温

*注意:使用各溶液之前,将溶液离心至管底NC(阴性对照)是一种不含m6ARNAMAS(m6A分析溶液)是一种含有m6A oligos和含有标准化100% m6A的。

营销中心

注意事项

保存建议 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存各组分。
警告 本品仅供科研使用,请勿用于临床与诊断。

 

FAQ

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