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在体内,组蛋白被染色质中的DNA包裹着。因此,在体外研究中,核糖体是比组蛋白和组蛋白衍生的肽更具有生理意义的底物。更重要的是,一些组蛋白甲基转移酶在HMT检测中使用核小体底物时,其活性和特异性明显提高,如DOT1L和NSD家族酶。核糖体也被广泛用于组蛋白甲基转移酶筛选试验,以确定用于药物发现的小分子抑制剂。组蛋白H3.1和组蛋白H3.3是在植物和动物中发现的两个主要组蛋白H3变体。众所周知,它们对基因调控很重要。组蛋白H3.1和H3.3已被证明表现出独特的基因组定位模式,被认为与它们在调节基因活性方面的特定功能有关。具体来说,组蛋白H3.3主要与基因激活相关的标记(H3K4me3、H2BK120ub1和RNA pol II占用)共同定位。组蛋白H3.1变体沉积到核小体中与典型的DNA合成依赖性沉积途径相关,而组蛋白H3.3主要作为S期以外的替代组蛋白H3变体,如在基因转录期间。组蛋白主要通过其PTMs和调节这些修饰的酶的改变与肿瘤发生有关,这表明它们可能破坏了这些标记的阅读、书写和/或擦除。除了靠近K9可以被甲基化或乙酰化,R8位点本身也可以被甲基化。组蛋白H3的突变在罕见的儿科胶质瘤和肉瘤中发生,具有很高的遗传渗透率。研究人员发现,H3 N端残基在PTM位点或附近的突变,包括R2、R8、K18和R26,可能充当oncohistones。
重组单核小体H3.3(R8C)-生物素由167bp的601个DNA和两个分子的组蛋白H2A(包括氨基酸1-130(末端))(登录号NM_003512)、H2B(包括氨基酸1-126(末端))(登录号NM_003518)、H3。 3包括氨基酸1-136(末端)(登录号NP_002098.1),有一个点突变Arg8Cys,和H4包括氨基酸1-103(末端)(登录号NM_003548)。所有这些组蛋白都在大肠杆菌细胞中表达。组蛋白八聚体的分子量为108kDa。
生物素重组单核小体H3.3(R8C),DNA凝胶 生物素重组单核小体H3.3(R8C),在2琼脂糖凝胶上运行,用溴化乙锭染色。泳道1:DNA标志物。泳道2:用于组装核小体的自由601 DNA。泳道3:完整的生物素重组单核小体H3.3(R8C)。完整的单个核小体H3.3(R8C)的迁移率比游离的601 DNA高很多。琼脂糖凝胶显示,几乎所有的601 DNA都包裹了组蛋白八聚体,形成核小体。
生物素重组单核小体H3.3(R8C),蛋白质凝胶 12.5% SDS-PAGE 凝胶,考马斯蓝染色 分子量:108 kDa 纯度:>92%
生物素重组单核小体H3.3(R8C)的链霉菌素下拉试验
24ug生物素化的单核体与10ul链霉菌素珠在4℃下孵化1小时。链霉蛋白珠用1毫升结合缓冲液洗3次。然后将珠子加入60ul 2×SDS装载缓冲液,在95℃下煮沸10分钟。2.4ul样品被加载并在12.5%的SDS-PAGE凝胶上运行,用考马斯蓝染色。SDS-PAGE凝胶的结果显示,几乎所有的生物素化单核小体都被链霉菌素珠拉下。关键词:- 生物素重组单核小体H3.3(R8C)
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
生物素重组单核小体H3.3(R8C)
81287 20ug
-80°C 生物素重组单核小体H3.3(R8C)
81987 1mg
-80°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
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