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在体内,组蛋白被染色质中的DNA包裹着。因此,在体外研究中,核小体是比组蛋白和组蛋白衍生的肽更具有生理意义的底物。更重要的是,一些组蛋白甲基转移酶在HMT检测中使用核小体底物时,其活性和特异性明显增强,如DOT1L和NSD家族酶。核小体也被广泛用于组蛋白甲基转移酶筛选试验,以确定用于药物发现的小分子抑制剂。组蛋白H3.1和组蛋白H3.3是在植物和动物中发现的两个主要组蛋白H3变体。众所周知,它们对基因调控很重要。组蛋白H3.1和H3.3已被证明表现出独特的基因组定位模式,被认为与它们在调节基因活动中的特定功能有关。具体来说,组蛋白H3.3主要与基因激活相关的标记(H3K4me3、H2BK120ub1和RNA pol II占用)共同定位。组蛋白H3.1变体沉积到核小体中与典型的DNA合成依赖性沉积途径相关,而组蛋白H3.3主要作为S期以外的替代组蛋白H3变体,如基因转录期间。组蛋白H3的突变在罕见的儿科胶质瘤和肉瘤中发生,具有很高的遗传渗透率。研究人员发现,H3 N端残基在PTM位点或附近的突变,包括R2、R8、K18和R26,可能作为oncohistones发挥作用。
重组单个核小体H3.3(K4I)-生物素由167bp的601个DNA组成,带有5'生物素标签和两个分子的组蛋白H2A,包括氨基酸1-130(末端)(登录号NM_003512),H2B包括氨基酸1-126(末端)(登录号NM_003518),H3。 3包括氨基酸1-136(末端)(登录号NM_005324),有一个点突变Lys4Ile,和H4包括氨基酸1-103(末端)(登录号NM_003548)。所有这些组蛋白都在大肠杆菌细胞中表达。组蛋白八聚体的分子量为108kDa。

生物素化重组单个核小体H3.3(K4I) 12.5% SDS-PAGE,考马斯蓝染色 分子量:108 kDa 纯度:>92%。

生物素化重组单个核小体H3.3(K4I) DNA凝胶 重组单个核小体H3.3(K4I)-生物素在2%琼脂糖凝胶上运行,用溴化乙锭染色。泳道1。DNA标志物。泳道2。自由的601个DNA,用于组装核小体。泳道3。完整的生物素化重组单个核小体H3.3(K4I)。完整的生物素化重组单个核小体H3.3(K4I)的迁移率比游离的601 DNA高很多。琼脂糖凝胶显示,几乎所有的601 DNA都包裹了组蛋白八聚体,形成核小 体。

生物素化重组单个核小体H3.3(K4I)的链霉菌素下拉试验 24微克生物素化的单个核小体与10微升链霉菌素珠在4℃下孵化1小时。链霉蛋白珠用1毫升结合缓冲液洗3次。将珠子加入60µl 2×SDS装载缓冲液中,在95℃下煮沸10分钟。将2.4微升样品装入12.5%的SDS-PAGE凝胶中,用Commassie蓝染色。SDS-PAGE凝胶的结果显示,几乎所有的生物素化单核体都被链霉菌素珠拉下。
关键词:- 生物素化重组单个核小体H3.3(K4I)
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
生物素化重组单个核小体H3.3(K4I) 81328 20ug -80°C 生物素化重组单个核小体H3.3(K4I) 81628 1mg -80°C 操作手册
1 1 常温
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