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图1:通过SDS-PAGE和Western blot分析组蛋白馏分 使用组蛋白纯化迷你试剂盒从各种来源(未受刺激的HeLa细胞、丁酸钠处理的HeLa细胞、紫杉醇处理的HeLa细胞和大鼠脑组织)纯化组蛋白。每个样品的第一次和第二次洗脱液(标记为第1次和第2次)在16% Tris-glycine SDS-PAGE凝胶(上图)和Western印迹(下图)上进行分析。识别乙酰组蛋白H3(Ac-H3,目录号39139,1:500稀释)、磷酸化Ser28组蛋白H3(Phos-H3,目录号39098,1:1000稀释)和三甲基Lys4组蛋白H3(Me-H3,目录号39159,1:1000稀释)的抗体。组蛋白小量纯化试剂盒能将核心组蛋白(H2A、H2B、H3和H4)作为一个整体进行纯化,同时保留其翻译后修饰,如乙酰化、甲基化和磷酸化状态。这种纯化方法是对酸沉淀法的改进,利用方便的离心柱和专有的缓冲系统,从细胞和组织样品中纯化核心组蛋白。用这种方法分离的组蛋白是下游检测和体外染色质组装的合适底物。
组蛋白小量纯化试剂盒 具有如下特点和优势:
- 唯一可用于组蛋白纯化的试剂盒
- 方便的离心柱形式
- 保留了组蛋白上的修饰
- 可从少至8x105个细胞中纯化组蛋白
- 适用于细胞或组织样品
与用酸沉淀法纯化组蛋白不同,我们的方法利用独特的纯化柱和一系列专有的洗脱缓冲液来分离纯的组蛋白馏分。该柱子对组蛋白有很高的结合能力,所以核心组蛋白可以从小的细胞培养样品或几克的组织中分离出来。使用组蛋白纯化迷你套装纯化组蛋白还能保留关键的翻译后修饰,如乙酰化、甲基化和磷酸化(图1)。

图1:通过SDS-PAGE和Western blot分析组蛋白馏分 使用组蛋白小量纯化试剂盒从各种来源(未受刺激的HeLa细胞、丁酸钠处理的HeLa细胞、紫杉醇处理的HeLa细胞和大鼠脑组织)纯化组蛋白。每个样品的第一次和第二次洗脱液(标记为第1次和第2次)在16% Tris-glycine SDS-PAGE凝胶(上图)和Western印迹(下图)上进行分析。识别乙酰组蛋白H3(Ac-H3,目录号39139,1:500稀释)、磷酸化Ser28组蛋白H3(Phos-H3,目录号39098,1:1000稀释)和三甲基Lys4组蛋白H3(Me-H3,目录号39159,1:1000稀释)的抗体。

图2:使用不同数量的HeLa细胞分析组蛋白产量
使用组蛋白小量纯化试剂盒从不同数量的HeLa细胞中提取组蛋白并加载到16%的SDS-PAGE凝胶上。纯化的HeLa核心组蛋白作为一个标准被平行加载。注意,在这个特定的凝胶系统上,H2A和H2B表现出重合的迁移。
泳道1:15微升的100微升洗脱液,来自于从一个150毫米组织培养板的HeLa细胞在100%汇合时(8 x 106个细胞)纯化的组蛋白。第2泳道。15微升50微升的组蛋白洗脱液,是从150毫米组织培养板上100%汇合的HeLa细胞(4 x 107个细胞)的二分之一数量的细胞中提纯的。第3泳道。从150毫米组织培养板上100%汇合的HeLa细胞(1.6 x 107个细胞)的五分之一的细胞中纯化的组蛋白的50微升洗脱液(15微升)。第4泳道。15微升的50微升洗脱液,来自于从150毫米组织培养板上100%汇合的HeLa细胞(8 x 105个细胞)的十分之一的细胞中纯化的组蛋白。第5泳道。2.5微克纯化的HeLa核心组蛋白。第6泳道。5微克纯化的HeLa核心组蛋白。关键词:- 组蛋白小量纯化试剂盒
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
组蛋白小量纯化试剂盒
CN40026-01 20次
2-8°C 组蛋白小量纯化试剂盒
CN40026-02 40次
2-8°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
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