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产品描述
适合从106-107培养细胞中分离纯化总RNA
细胞经强烈的裂解液溶解并过滤去除蛋白杂质。在含有RNA的滤液中补加乙醇后加入核酸纯化柱,RNA结合在核酸纯化柱上,残留的蛋白与PCR抑制物则被过滤除去,RNA经Buffer WA和Buffer WB洗涤后,用RNase-free水洗脱,即可用于各种分子生物学实验。
产品简介
试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,可从培养细胞中快速提取总RNA,可同时处理大量不同样品。20-40分钟内即可完成反应,提取的总RNA纯度极高,没有蛋白质和其他杂质污染。
产品特点
·20-40分钟内即可完成细胞总RNA的分离与纯化
·过滤柱技术快速去除细胞溶解物中的杂质
·无需酚氯仿抽提和异丙醇沉淀步骤实验参数
·时间:20-40分钟
·起始样品体积:106-107培养细胞
·结合能力:最多可吸附50 μg总RNA
·洗脱体积:50-100 μl
·应用:RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、mRNA分离实验实例
右图:从不同细胞中提取的RNA的效果
M:λ-EcoT14 I digest
泳道1:用IVDSHOW培养细胞总RNA试剂盒从2×106 HL-60细胞中分离纯化的RNA。
泳道2:用IVDSHOW培养细胞总RNA试剂盒从2×106 HEK239细胞中分离纯化的RNA。
泳道3:用IVDSHOW培养细胞总RNA试剂盒从2×106 K562细胞中分离纯化的RNA。
泳道4:用IVDSHOW培养细胞总RNA试剂盒从2×106 SGC-7901细胞中分离纯化的RNA。可适用的分子生物学实验
1.RT-PCR
2.Nothern blot,Dot blot
3.mRNA分离关键词:- IVDPure 培养细胞总RNA提取试剂盒【含DNase I】
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产品组分
*注意:在使用各溶液之前,将溶液离心至管底。组分内容
型号:R-5014-050(50次) 型号:R-5014-200(200次)
储存温度
核酸纯化柱 50 套 200 套
室温
2ml 离心管
50 套 200 套
室温 β-巯基乙醇 500 ul 2 ml 室温 Buffer RLT 32 ml 128 ml 室温 DNase I 270 ul 1.08 ml -20°C Buffer RDD
2.5 ml 10 ml
室温 Buffer WA(浓缩液)
24 ml 96 ml
室温 Buffer WBR(浓缩液)
9.5 ml 38 ml
室温 RNase-Free Water
6 ml 24 ml
室温 说明书
1份 1份 室温
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文件资源
文件下载 文件内容 资源说明 
R-5014-IVDPure 培养细胞总RNA提取试剂盒【含DNase I】 操作手册 
R-5014-IVDPure 培养细胞总RNA提取试剂盒【含DNase I】相关说明 宣传单页 -
注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 警告 一般仅供科研使用,请勿用于临床与诊断。 -
FAQ
Q:如果样本是纯化片段化的mRNA【短片段的mRNA】,过滤柱除大片段RNA的步骤可以省略,按以下操作步骤操作:
1. 用50 µl RNase-Free Water 彻底溶解mRNA,加入900 ul Buffer TL,混合均匀。
2. 加入200 µl Buffer EX,盖上管盖,用力摇晃15秒,12000× g 离心 15 分钟。
3. 吸取500 µl上层水相,转移到一个洁净的1.5 ml 离心管中,加入1ml无水乙醇,勿弃吸头,直接用吸头吸注三次混匀,,吸取730 µl混合液加入到核酸纯化柱中,盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
4. 弃2 ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2 ml 离心管中,将1.5 ml 离心管中剩余的液体全部倒入核酸纯化柱中,盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
5. 将核酸纯化柱置回到2 ml 离心管中,在核酸纯化柱中加入500 µl Buffer WA, 盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
6. 弃2 ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2 ml 离心管中,在核酸纯化柱中加入600 µl Buffer WBR, 盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
7. 弃2 ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2ml 离心管中,14000 rpm 离心1分钟。
8. 弃2 ml 离心管,将核酸纯化柱置于一个RNase-free的1.5 ml离心管中,在纯化柱中加入30~50 µl RNase-Free Water,盖上管盖,室温静置1分钟,12000 rpm 离心30秒。
9. 弃纯化柱,洗脱的RNA可立即用于各种分子生物学实验;或者将RNA储存于-70℃备用。如采用的是:200ul的RNA样本。可将50 ul RNA改成100 ul RNA,分两次操作。在加乙醇的步骤前分开操作,在过柱的步骤时多次过同一个纯化柱。如果RNA浓度比较低的话,这样操作可以达到浓缩RNA的目的。后面再将2次过柱的RNA,合在一起即可。
Q:如果样本是纯化好的片段化的总RNA【片段化的总RNA】,片段大小在100nt左右。按以下操作步骤操作【无须改动步骤】:
1. 用50 µl RNase-Free Water 彻底溶解mRNA,加入900 ul Buffer TL,混合均匀。
2. 加入200 µl Buffer EX,盖上管盖,用力摇晃15秒,12000× g 离心 15 分钟。
3. 吸取500 µl上层水相,转移到一个洁净的1.5 ml 离心管中,加入1ml无水乙醇,勿弃吸头,直接用吸头吸注三次混匀,,吸取730 µl混合液加入到核酸纯化柱中,盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
4. 弃2 ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2 ml 离心管中,将1.5 ml 离心管中剩余的液体全部倒入核酸纯化柱中,盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
5. 将核酸纯化柱置回到2 ml 离心管中,在核酸纯化柱中加入500 µl Buffer WA, 盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
6. 弃2 ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2 ml 离心管中,在核酸纯化柱中加入600 µl Buffer WBR, 盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
7. 弃2 ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2ml 离心管中,14000 rpm 离心1分钟。
8. 弃2 ml 离心管,将核酸纯化柱置于一个RNase-free的1.5 ml离心管中,在纯化柱中加入30~50 µl RNase-Free Water,盖上管盖,室温静置1分钟,12000 rpm 离心30秒。
9. 弃纯化柱,洗脱的RNA可立即用于各种分子生物学实验;或者将RNA储存于-70℃备用。
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