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去内毒素质粒小提试剂盒采用非常简单快速的方法，通过旋柱形式从 1~10 ml 液体培养物中纯化质粒 DNA。通过简单的洗涤和旋转步骤就能纯化出无 RNA 和内毒素 污染的高质量 DNA。该试剂盒包括独特的内毒素去除洗涤液，用于去除转染所需的内毒素。DNA
DNA 纯度足以直接用于大多数应用，如 PCR、限制性消化、克隆、自动 DNA 测序、Southern 印迹、体外 转录检测和转染等。
开始操作前
- 使用前，将整瓶RNase A 储存液 （使用前短暂离心）与溶液 I 混合，配成 250 µg/ml 终浓度的 RNase A。混合后请在 4°C 下保存。
- 向内毒素去除清洗液 中加入异丙醇 [DP01-Plus 为 12 毫升（或）DP01-Plus-300 为 72 毫升]，混匀。在 RT 温度下保存。
- 在洗涤液 中加入乙醇 [DP01-Plus 为 64 毫升（或 DP01-Plus-300 为 384 毫升）]，混匀。在 RT 温度下保存。
- 打开水浴锅，温度为 60~65℃。
一般程序：
1. 在微型离心机中以最高转速（12,000~14,000xg）离心 1 分钟，将 1~10 毫升细菌培养液离心。弃去上清液并去除多余的培养基。
注意：
如果液体培养 > 5 ml，请增加溶液 I、溶液 II 和溶液 III 的体积以防止产品损失。
2. 用移液管或涡旋将细胞团完全重悬于 200 μl 的溶液 I 中。
3. 加入 200 μl 溶液II ，倒转试管 5 次进行混合；细胞悬浮液应立即变清。
4. 加入 200 μl 溶液III ，倒转试管 5 次进行混合。
5. 将裂解液在微离心机中高速离心 5 分钟。在离心管的侧面或底部会形成紧密的白色颗粒。
6. 将旋转柱 插入收集管中，小心地将步骤 5 中的所有透明裂解液直接移至旋转柱中，高速离心 1 分钟。
7. 7. 弃去滤液，将 500 μl内毒素去除洗涤液（添加异丙醇） 装入自旋柱， 等待 2 分钟使其与膜平衡，然后高速旋转 1 分钟。
8. 丢弃收集管中的滤液，向旋转柱中 加入 700 μl 的洗涤液 ，然后高速离心 1 分钟。重复此步骤一次。
9. 丢弃滤液，再用最高转速离心 5 分钟，以去除残留的微量乙醇。
* 如果离心速度低于 12,000x g 或必须完全去除残留乙醇，则将旋转柱放入加热炉（60°~65C）中温育 5 分钟，以蒸发掉所有乙醇。
10. 10. 将离心柱 转移到新的微离心管中，加入 50~200 μl洗脱液 或H2O（pH 7.0~8.5） ，等待 1~2 分钟。
(对于大于 7 kb 的质粒 DNA，可使用预热（60~65°C）的洗脱液进行洗脱）。
11. 11. 高速离心 1 分钟，洗脱 DNA。将洗脱后的质粒 DNA 保存在 -20°C 下。
*在纯度为 1.8~2.0 (A260/A280) 的情况下，培养 1~10 毫升大肠杆菌可获得 6~60 微克的质粒 DNA。
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产品组分
*注意：在收到产品组分后，请将溶液置于-20°C保存。组分内容
型号:DP01P-50（50次） 型号:DP01P-300（300次）
储存温度
1.Solution I 12 ml 62 ml 室温
2.RNase A Stock* 30 ul 155 ul -20°C 3.Solution II 12 ml 62 ml 室温 4.Solution III 12 ml 62 ml 室温 5.Endotoxin Removal Wash Solution 18 ml 108 ml
室温 6.Wash Solution 16 ml 96 ml
室温 7.Elution Solution 12 ml 62 ml
室温 8.RNA Spin Colunm with Collection Tube 50 套 300 套
室温 9.Collection Tube 50 套 300 套
室温 说明书
1份 1份 室温
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文件资源
文件下载 文件内容 资源说明 
DP01P-去内毒素质粒小提试剂盒 操作手册 DP01P-去内毒素质粒小提试剂盒相关说明 分子目录 -
营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 警告 一般仅供科研使用，请勿用于临床与诊断。 -
FAQ
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