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蛋白磷酸化是重要的共价翻译后修饰,可以改变蛋白质的结构构象,并调控靶蛋白的功能,位置和特异性结合。许多细胞过程受蛋白质的可逆磷酸化调控,30%的蛋白质可能在其存在过程中被磷酸化。
由于内源性蛋白的产生和降解处于平衡状态,因此在稳定的环境条件下其细胞水平是稳定的。细胞粗提取物含有许多内源性酶,例如磷酸酶和蛋白酶,其能够降解和改变提取物中的蛋白。提高完整蛋白产量的最佳方法是加入这些酶的抑制剂。
Phosphatase Inhibitor Cocktail 1抑制碱性磷酸酶的L-同功酶和丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,例如蛋白磷酸酶1和2A(PP1和PP2A)。在来自不同动物组织的细胞提取物中对Phosphatase Inhibitor Cocktail 1进行了优化和测试。
该Phosphatase Inhibitor Cocktail 1含有Cantharidin,Bromotetramisole和Microcystin LR。该Phosphatase Inhibitor Cocktail以DMSO的即用溶液提供。
关键词:- Phosphatase Inhibitor Cocktail 1 (100X in DMSO)
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
Phosphatase Inhibitor Cocktail 1 (100X in DMSO)
K1012-01 1mL
-20°C
Phosphatase Inhibitor Cocktail 1 (100X in DMSO)
K1012-02 10mL
-20°C
Phosphatase Inhibitor Cocktail 1 (100X in DMSO)
K1012-03 50mL
-20°C
Phosphatase Inhibitor Cocktail 1 (100X in DMSO)
K1012-04 100mL
-20°C
操作手册
1 1 常温
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文件资源
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K1012-Phosphatase Inhibitor Cocktail 1 (100X in DMSO) 操作手册 
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注意事项
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FAQ
1)Q:实验中经常用PMSF来保护蛋白,蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势?
A:PMSF只能抑制一种蛋白酶(丝氨酸蛋白酶),Cocktail抑制的更全面且更加持久;此外,PMSF毒性较高并且PMSF更容易降解失效。
2)Q:抑制剂Cocktail可以反复冻融吗?
A:可以反复冻融,但是尽量减少反复冻融的次数。
3)Q:应该选择片剂的Cocktail还是溶液型Cocktail?
A:两种类型的产品都含有添加物,片剂中含有若干种公司专利的未经公开的医药成分,而溶液型产品中含有溶剂成分DMSO。一般来说这些添加物是不会影响产品效果的。溶液型需要的加工步骤少,因而质量好价格低。而片剂产品在储存和运输两个环节具有优势。(片剂能够在4度储存而不需要零下20度)。
4)Q:用了Cocktail,蛋白仍然降解是怎么回事?
A:蛋白酶抑制剂Cocktail作用是保护蛋白免受蛋白酶降解,提高蛋白得率。对于绝大多数蛋白,Cocktail都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况,可检查实验操作步骤和设计,减少导致蛋白降解的环节。例如,细胞处理前,先要将Cocktail加入到裂解液中并混匀,收集完细胞后立即加入准备好的裂解液。
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1. Haibing Zhan, Xuhong Chang, et al. "LncRNA MEG3 mediates nickel oxide nanoparticles-induced pulmonary fibrosis via suppressing TGF-β1 expression and epithelial-mesenchymal transition process." Environ Toxicol. 2021 Jun;36(6):1099-1110. PMID:33547861
2. Yu ZQ, Yi HY, et al. "Ginsenoside Rg1 Suppresses Type 2 PRRSV Infection via NF-κB Signaling Pathway In Vitro, and Provides Partial Protection against HP-PRRSV in Piglet." Viruses. 2019 Nov 10;11(11). pii: E1045. PMID:31717616
3. Losier TT, Akuma M, et al. "AMPK Promotes Xenophagy through Priming of Autophagic Kinases upon Detection of Bacterial Outer Membrane Vesicles." Cell Rep. 2019 Feb 19;26(8):2150-2165.e5. PMID:30784596
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