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真核驱动蛋白能协调细胞内的各种动力学活动。 研究表明,它们能沿着微管轨道移动染色体和囊泡等货物 (1)。 它们在细胞骨架结构的组织中也扮演着重要角色,有丝分裂过程中微管纺锤体的建立就是证明(2)。
驱动蛋白利用 ATP 水解的能量沿微管(MT)基质运动。 一旦驱动蛋白马达与其 MT 轨道结合,马达的 ATPase 速率通常会提高几百至几千倍(3)。 MT 激活的驱动蛋白 ATPase 是电机功能的一个主要参数,也是在各种实验条件下监测和研究驱动蛋白活性的一个有力方法。
我们开发了驱动蛋白ATP酶末端生化分析试剂盒(BK053)。驱动蛋白终点检测法是测量驱动蛋白在微管激活 ATPase 活性过程中产生的无机磷酸盐 (Pi) 的一种极其快速而经济的方法。 它可以在均质反应中同时进行大量检测,因此非常适合 HTS 应用。该检测基于在 650 纳米波长下测量的比色变化。

图 1. 用 Eg5 特异性抑制剂 Monastrol 抑制驱动蛋白的活性。结果显示了在 100 µM 莫那司特罗存在下驱动蛋白全部活性的百分比。不出所料,只有 Eg5 ATPase 的活性受到了莫那司特罗的抑制。在 9 个不同的驱动蛋白运动结构域上测试了 Eg5 特异性抑制剂莫那司特罗的活性(参见 CMW 页面)。在被检测的运动结构域中,只有 Eg5 的 ATPase 活性受到抑制。
驱动蛋白ATP酶末端生化分析试剂盒具有如下优势和特点:
- 测量微管激活的驱动蛋白 ATP 酶活性
- 发现/表征驱动蛋白抑制剂
- 发现/表征驱动蛋白调节辅助因子
References
- Goldstein, L. (1993) Annu. Rev. Genet. 27, 319-351
- Sawin, K. E. and Scholey, J. M. (1991) Trends Cell Biol. 1, 122-129
- Kuznetsov, S. A., and Gelfand, V. I. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83, 8530-8534
关键词:- 驱动蛋白ATP酶末端生化分析试剂盒
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产品组分
内容 型号 规格 储存温度
驱动蛋白ATP酶末端生化分析试剂盒
BK053 1000次 2-8°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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Author Title Journal Year Article Link Wang, Wenjuan et al. The architecture of kinesin-3 KLP-6 reveals a multilevel-lockdown mechanism for autoinhibition Nature Communications 2022 13:1 2022 ISSN 2041--1723 Aguilera, Cinthia et al. The Novel KIF1A Missense Variant (R169T) Strongly Reduces Microtubule Stimulated ATPase Activity and Is Associated With NESCAV Syndrome Frontiers in Neuroscience 2021 ISSN 1662-453X Fukai, Ryota et al. Design, synthesis, and evaluation of a novel prodrug, a S-trityl-L-cysteine derivative targeting kinesin spindle protein European Journal of Medicinal Chemistry 2021 ISSN 1768-3254 Bae, Jinhye et al. A Micromachined Picocalorimeter Sensor for Liquid Samples with Application to Chemical Reactions and Biochemistry Advanced Science 2021 ISSN 2198-3844 Tao, Li et al. Tum/RacGAP functions as a switch activating the Pav/kinesin-6 motor Nature Communications 2016 ISSN 2041-1723 Reuter, Jason A. et al. Simul-seq: Combined DNA and RNA sequencing for whole-genome and transcriptome profiling Nature Methods 2016 ISSN 1548-7105 Luo, Ruibai et al. Direct functional interaction of the kinesin-13 family membrane kinesin-like protein 2A (Kif2A) and Arf GAP with GTP-binding Protein-like, ankyrin repeats and PH domains1 (AGAP1) Journal of Biological Chemistry 2016 ISSN 1083-351X Carbajales, Carlos et al. Structure-based design of new KSP-Eg5 inhibitors assisted by a targeted multicomponent reaction ChemBioChem 2014 ISSN 1439-7633 Holland, Jason P. et al. Synthesis and Evaluation of Biphenyl Compounds as Kinesin Spindle Protein Inhibitors Chemistry & Biodiversity 2013 ISSN 1612--1880 Holland, Jason P. et al. Fluorinated quinazolinones as potential radiotracers for imaging kinesin spindle protein expression Bioorganic & medicinal chemistry 2013 ISSN 1464--3391 Funk, C. Joel et al. Development of high-throughput screens for discovery of kinesin adenosine triphosphatase modulators Analytical Biochemistry 2004 ISSN 0003-2697
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