重组PRC2 EZH2(Y641N)复合体

重组PRC2 EZH2(Y641N)复合体，Recombinant PRC2 EZH2(Y641N) complex，非常适合开展酶动力学活性测定、抑制剂筛选和选择性分析实验。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。

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重组蛋白

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PRC2（Polycomb Repressive Complex 2，多聚胞抑制复合体2）是多聚胞群或PcG蛋白（另一个是PRC1）的两类之一，是干细胞特性的重要表观遗传决定因素。在细胞命运决定和分化过程中，它们在基因的长期表观遗传沉默中发挥着重要作用。PRC2 是染色质的抑制因子。PRC2需要定向招募到要沉默的基因组区域的特定DNA序列（称为Polycomb反应元件或PREs）。与染色质结合后，PRC2 亚基 EZH2 具有组蛋白甲基转移酶活性，可催化组蛋白 H3 Lys27 的三甲基化。H3K27me3 是染色质受抑制区域的标志。Lys27 的三甲基化导致 PRC1 中的含染色质域蛋白结合 H3K27me3，从而招募 PRC1。PRC1 负责细胞分化后的长期基因沉默。

重组 PRC2 EZH2(Y641N) 复合物是野生型 PRC2 复合物的突变体，它含有 EZH2 SET 结构域酪氨酸 641 的 Tyr-Asn突变。在非霍奇金淋巴瘤患者中发现了酪氨酸 641 的体细胞突变，包括 Y641F、Y641N、Y641C、Y641S 和 Y641H，这些突变已被证明会改变 EZH2 对组蛋白 H3 赖氨酸 27 (H3K27) 甲基化状态的底物特异性和催化活性，导致 H3K27 三甲基化增加。

重组 PRC2 EZH2 (Y641N) 复合物在 Sf9 中表达，其中包括全长 EZH2（Y641N 突变）与全长 SUZ12、EED 和 RbAp46/48 复合物（登录号分别为 NP_001190176.1、NP_056170、NP_003788.2、NP_002884.1 和 NP_005601.1），EZH2 的 N 端含有一个 FLAG-Tag。表达的 EZH2(Y641N)、SUZ12、EED 和 RbAp46/48 的分子量分别为 87 kDa、83 kDa、50.2 kDa、47.8 kDa 和 47.7 kDa。重组蛋白的 SDS-PAGE 纯度大于 92%。

PRC2 EZH2 (Y641N) 复合物适用于酶动力学研究、抑制剂筛选和选择性分析。

重组 PRC2 EZH2 (Y641N) 复合物凝胶。在 10% SDS-PAGE 凝胶上检测 PRC2 EZH2(Y641N) 复合物，并用考马斯蓝染色。

重组 PRC2 EZH2 (Y641N) 复合物活性的 HTRF 分析。将 1 µM H3K27me2 肽与 PRC2 EZH2 (Y641N) 复合物在反应缓冲液（包括 50 mM Tris-HCL pH 8.6、0.02% Triton X-100、2 mM MgCl2、1 mM TCEP 和 50 µM SAM）中室温孵育 3 小时。用抗 H3K27me3 抗体检测反应产物。

MALDI-TOF 检测 PRC2 EZH2 (Y641N) 的活性。3.3 µM H3K27me2 肽与 40 nM PRC2 EZH2 (Y641N) 复合物在反应缓冲液中室温下孵育 3 小时。活性通过 MALDI-TOF 检测。

催化能力：80 转/酶分子。
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- 重组PRC2 EZH2(Y641N)复合体

产品组分

内容	型号	规格	储存温度
重组PRC2 EZH2(Y641N)复合体	31390	20ug	-80°C
重组PRC2 EZH2(Y641N)复合体	31790	1mg	-80°C
操作手册	1	1	常温

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