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总体RNA甲基化极易定量检测试剂盒(荧光法)

总体RNA甲基化极易定量检测试剂盒(荧光法),非常适合从各种细胞、组织、哺乳动物、真菌、细菌、植物、血浆和血清等样本中提取的总RNA,进行总体水平的RNA甲基化定量分析,整个实验时间仅需2.4小时。主要检测仪器:荧光分光光度计。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。


关键词

总体RNA甲基化极易定量检测试剂盒(荧光法)

5-mC


所属分类


目录号

A-P-9009

  • 产品描述
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  • 文献追踪
  •  在DNA中5-甲基胞嘧啶通过DNA甲基转移酶甲基组的同价原理发生在胞嘧啶环的第五位碳原子上。这个过程很好地被研究并且通常伴随有基因的表达和抑制。尤其是在人类中观测到,5-甲基胞嘧啶发生在各种形式的RNA分子中,包括tRNAs,rRNAs,mRNAs和非编码RNAs(ncRNAs)。5-甲基胞嘧啶看起来都富集于ncRNA这类中,但是相对的在mRNAs中是在减少。 5-甲基胞嘧啶的水平在动物基因组中是不一样的,水平量在一些昆虫中不被发觉的到在人类细胞中大概有0.1-0.45%的总RNA量。大多数(83%)的5-甲基胞嘧啶是在mRNAs中发现的。在这些转录中,5-甲基胞嘧啶在蛋白编码测序中出现减少;而在5’和3’UTRs中出现富集。众所周知,2种不同的甲基转移酶,NSUN2和DNMT2在真核生物RNA中通过催化5-甲基胞嘧啶的修饰形式,会减少5-mC。现在已经有很有力的证据表明:RNA胞嘧啶的甲基化影响着各种生物进化的规则例如:RNA稳定性和mRNA翻译。此外,在拱形RNAs中5-mC的缺失会异常的引起相关的小RNA片段化且这些小RNA发挥着正常的功能。因此,拱形ncRNA的损失可能有助于发现人类因缺失NSUN2而引起的发挥失调。

    最近,一些新颖的核苷酸修饰形式,首先在DNA中发现。比如:5-hmC,5-fC,5-caC。同时这些形式在人类和小鼠的组织中也被检测到。这些修饰的核苷酸一般是由5-mC氧化后得到的;通过TET家族酶反应得到。

    精确和方便的定量检测5-甲基胞嘧啶是极其的有用。在各种生理学上和病变中,识别和理解发生在RNA上的5-mC甲基化水平的变化是非常有意义的。目前仅有的基于色谱的技术比如:MS-LC对于检测RNA中总体的5-mC水平。然而,这种方法费时,通量低,需要的RNA量多和高成本。为了解决这些问题,我们联合国外知名的表观遗传学公司特别的开发了:总体RNA甲基化极易定量检测试剂盒(荧光法)。

    本试剂盒有以下优点和特性:

    • 极速:整个操作步骤仅需2小时40分钟完成。基于一个样本2份分析测定。
    • 稳定:这款试剂盒容许分析过程有更大的信号窗口,且复孔只有微小的变化。
    • 方便:内在低背景噪音,可以消除孔板阻断的步骤。
    • 高敏,检测的最低下限为 0.02%的 5-mC RNA,RNA输入量是:200ng 。
    • 特异性:高特异性地结合5-mC,在未甲基化的胞嘧啶或羟甲基化胞嘧啶不会产生交叉反应;针对不同的浓度范围的样本RNA。
    • 普遍性:阳性对照和阴性对照容许对任何物种的RNA,检测5-mC RNA。
    • 精确性:最佳的阳性对照是可以按照一定的百分比,分成几部分,然后绘制标准曲线,精确性更高。结果堪比HPLC-MS色谱分析。甚至更优。
    • 灵活性:96孔可拆卸板模式使研究人员能根据自己需要选择手工或是高通量模式分析。
    • 操作简便、可信、分析条件始终如一。
  • 产品组分

    组分内容

    型号:A-P-9009-48(48次)

    型号:A-P-9009-96(96次)

    储存温度

    WB

    10X Wash Buffer

    14 ml

    28 ml

    4°C

    BS

    Binding Solution

    5 ml10 ml室温

    NC

    Negative Control,containing 0% 5-mC,50ug/ml *

    50 ul

    100 ul

    -20°C

    PC

    Positive Control,containing 2% 5-mC,50ug/ml *

    10 ul

    20 ul

    -20°C

    mcAb

    5-mC Antibody,1000X*

    5 ul10 ul4°C

    SI

    Signal Indicator,1000X*

    5 ul10 ul-20°C

    ES

    Enhancer Solution,1000X*

    5 ul10 ul-20°C

    FD

    Fluoro Developer

    12 ul24 ul-20°C
    FEFluoro Enhancer12 ul24 ul-20°C

    DB

    Dilution Buffer

    5 ml

    10 ml

    室温

    8-联管

    8-Well Assay Strips(With Frame)

    6

    12

    4°C

    操作手册

     

    1

    1

    室温

    *注意:在使用各溶液之前,将溶液离心至管底。注:NC(阴性对照)是未甲基化的RNA,包含0%的5-甲基胞嘧啶(5-mC)。PC(阳性对照)是甲基化的RNA和含有2%的5-甲基胞嘧啶(5-mC)。

  • 文件资源

    文件下载

    文件内容

    资源说明

    A-P-9009-总体RNA甲基化极易定量检测试剂盒(荧光法)

    操作手册

    A-P-1030-总体DNA甲基化极易定量检测试剂盒(比色法)相关说明

    宣传单页
  • 营销中心

  • 注意事项

    保存建议 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存各组分。
    警告 本品仅供科研使用,请勿用于临床与诊断。

     

  • FAQ

     

  • Fan W et. al. (October 2024). Tet2 modulates M2 macrophage polarization via mRNA 5-methylcytosine in allergic rhinitis. Int Immunopharmacol. 143(Pt 3):113495.

    Zhang RK et. al. (October 2024). RNA methyltransferase NSUN2-mediated m5C methylation promotes Cr(VI)-induced malignant transformation and lung cancer by accelerating metabolism reprogramming. Environ Int. 192:109055.

    Liu L et. al. (April 2024). YBX1 Promotes Esophageal Squamous Cell Carcinoma Progression via m5C‐Dependent SMOX mRNA Stabilization. Adv Sci (Weinh). :e2302379.

    Yu T et. al. (January 2024). Effects of methionine deficiency on B7H3-DAP12-CAR-T cells in the treatment of lung squamous cell carcinoma. Cell Death Dis. 15(1):12.

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    Zhang G et. al. (July 2023). NSUN2 stimulates tumor progression via enhancing TIAM2 mRNA stability in pancreatic cancer. Cell Death Discov. 9(1):219.

    Wang Y et. al. (May 2023). Aberrant m5C hypermethylation mediates intrinsic resistance to gefitinib through NSUN2/YBX1/QSOX1 axis in EGFR-mutant non-small-cell lung cancer. Mol Cancer. 22(1):81.

    Betlej G et. al. (October 2022). RNA 5-methylcytosine status is associated with DNMT2/TRDMT1 nuclear localization in osteosarcoma cell lines. J Bone Oncol. 36:100448.

    Bataglia L et. al. (July 2021). Active genic machinery for epigenetic RNA modifications in bees. Insect Mol Biol.

    Park MH et. al. (January 2020). Mono-(2-Ethylhexyl)phthalate Regulates Cholesterol Efflux via MicroRNAs Regulated m<sup>6</sup>A RNA Methylation. Chem Res Toxicol.

    Lewinska A et. al. (August 2017). Reduced levels of methyltransferase DNMT2 sensitize human fibroblasts to oxidative stress and DNA damage that is accompanied by changes in proliferation-related miRNA expression. Redox Biol. 14:20-34.

    Lewinska A et. al. (February 2017). Downregulation of Methyltransferase Dnmt2 Results in Condition-dependent Telomere Shortening and Senescence or Apoptosis in Mouse Fibroblasts. J Cell Physiol.

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