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最新报道，5-甲基胞嘧啶（5-mC）不仅广泛的存在于基因组DNA 中，在RNA 中也普遍存在。但是，RNA 甲基化的功能仍不清楚。有些研究认为RNA 甲基化在翻译调控中起着重要作用，而有些研究认为其在RNA 的稳定性及结构中起着重要作用。在人类中, 5-mC 会出现在各种不同形式的RNA 分子上，包括tRNAs,rRNAs,mNRAs,非编码RNA(ncRNAs)等。至少有10275 个的5-mC 候选位点被发现在mRNAs 和ncRNAs,它覆盖了10.6%残留在转录组的总胞嘧啶。5-mC 似乎浓缩在某些类型的ncRNA,但相对缺乏mRNAs。然而,绝大多数(83%)的候选位点中发现在mRNAs。在这些转录组上, 5-mC 似乎耗尽在蛋白质编码序列，且浓缩在5’和3’UTRs。两个不同的甲基转移酶,NSUN2 和DNMT2 已知催化5-mC 修改在真核生物的RNA。
最近强有力的数据表明,RNA 胞嘧啶甲基化作用影响着调节各种生物过程，如RNA 稳定性与信使核糖核酸（mRNA）的翻译。此外,损失5-mC 在vault RNAs 导致异常的处理成Argonaute-associated 小RNA 片段, 可以作为小分子核糖核酸( 即microRNA) 。因此, 受损的处理的vault ncRNA 可能与导致人类疾病的病因NSUN2-deficiency 人类疾病相关。亚硫酸氢盐转化RNA,紧接着是RT-PCR 扩增、克隆和可信的测序分析，来收集可靠的关于RNA 胞嘧啶甲基化状态的信息，变得尤为重要。由于RNA 的不稳定性，导致对于RNA 的研究十分困难。为此，我公司给您强烈推荐RNA 甲基化修饰试剂盒，解决了如上的问题。该产品包括了进行修饰所有必要组件，独特设计的混合液配方包含了RNA 的保护剂，以防降解。这样有效保证了胞嘧啶转化成尿嘧啶，而甲基化
的胞嘧啶几乎不受影响。无毒的RNA 紧紧的结合在离心柱基质上， RNA 可以有效去除残余的亚硫酸氢和盐，得到纯净的修饰RNA。洗脱后的RNA 可以用于做qMSP（即RT-PCR），克隆，MS-HRM和测序分析（如：焦磷酸分析和深度测序）等各种RNA 甲基化后续实验分析。产品功能简介如下：
合作开发的RNA甲基化修饰试剂盒。这个工具是专门为亚硫酸氢盐转化和验证RNA而设计的，具有如下的优势和特性：- 快速简便的操作流程仅需3 小时
- 将未甲基化的RNA 胞嘧啶（C）完全转化为尿嘧啶（U），转化率>99.9% ；不当或错误的转化率<0.1% (甲基化胞嘧啶转化成胸腺嘧啶)。
- 强给力的RNA 保护剂有效防止了RNA 的降解，保护了>90%的RNA。
- 包括的对照引物是专门针对特异转化后的RNA 设计的，可以用来测试其是否完全正确的实现了亚硫酸盐转化。
- 可用于亚硫酸盐转化的RNA 低至每次反应5 ng
- 简单、可信和实验条件始终如一。
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产品组分
组分内容
型号：A-P-9003-50(50次)
型号：A-P-9003-100(100次) 储存温度
CB
Conversion Buffer
8 ml
16 ml
室温 CP
Conversion Powder 5 瓶 10 瓶 室温 NBS
NA Binding Buffer
13 ml 26 ml 室温 FSC
F-Spin Column
50 个
100 个
室温 FCT
F-Collection Tube
50 个 100 个 室温 DS
Desulphonation Solution
300 ul 600 ul 室温 CPF
Control Primer-F (10uM)
10 ul 20 ul -20°C CPR
Control Primer-R (10uM) 10 ul 20 ul -20°C EB
Elution Buffer
1.2 ml
2.4 ml
室温 操作手册
1
1 室温
*注意：在放到微型离心机之前，应将离心柱盖子盖紧。
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营销中心
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注意事项
保存建议 推荐蓝冰或冰袋运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存各组分。 警告 本品仅供科研使用，请勿用于临床与诊断。 -
FAQ
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Dai Q et. al. (January 2024). Ultrafast bisulfite sequencing detection of 5-methylcytosine in DNA and RNA. Nat Biotechnol.
Zhang LS et. al. (December 2023). Base-Resolution Sequencing Methods for Whole-Transcriptome Quantification of mRNA Modifications. Acc Chem Res.
Ortiz-Barahona V et. al. (May 2023). Epigenetic inactivation of the 5-methylcytosine RNA methyltransferase NSUN7 is associated with clinical outcome and therapeutic vulnerability in liver cancer. Mol Cancer. 22(1):83.
Hammam E et. al. (November 2021). Malaria Parasite Stress Tolerance Is Regulated by DNMT2-Mediated tRNA Cytosine Methylation. mBio. :e0255821.
Henry BA et. al. (April 2020). 5-Methylcytosine Modification of an Epstein-Barr Virus Noncoding RNA Decreases its Stability. RNA.
Xu X et. al. (October 2019). Advances in methods and software for RNA cytosine methylation analysis. Genomics.
Janin M et. al. (August 2019). Epigenetic loss of RNA-methyltransferase NSUN5 in glioma targets ribosomes to drive a stress adaptive translational program. Acta Neuropathol.
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