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PDE3A时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒
磷酸二酯酶（PDEs）在 cAMP 和 cGMP 信号的动态调节中发挥着重要作用。PDE3A 又称 cGMP 抑制型磷酸二酯酶，由蛋白激酶 A 和 B 激活，并被 cGMP 抑制。它通过调节心肌和血管平滑肌的收缩力以及血小板的聚集，被认为与心血管功能有关。根据其在卵母细胞中的表达，它还与生育能力有关。PDE3A 和 PDE3B 抑制剂显示出治疗心血管疾病的前景，但会导致心律失常等副作用。在肺癌和乳腺癌中发现了 PDE3A，它通过下调 cAMP/PKA 通路介导癌细胞干性，其水平与临床预后有关。在动物模型中使用 PDE3A 抑制剂可减少乳腺癌的转移，可能被证明是治疗癌症的有力工具。
PDE3A TR-FRET 检测试剂盒设计用于利用时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 技术快速、简便地鉴定 PDE3A（磷酸二酯酶 3A）抑制剂。PDE3A TR-FRET 检测试剂盒采用 96 孔或 384 孔规格，内含足够的重组纯化 PDE3A（氨基酸 669-末端）酶、荧光标记的 PDE 底物（cAMP）、结合剂和 PDE 检测缓冲液，可用于 100 或 384 次酶反应。
图 1：PDE3A时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒示意图。
该反应使用荧光素连接（FAM）的环状单磷酸核苷酸。 磷酸二酯酶 PDE3A 催化水解环状单磷酸核苷酸中的磷酸二酯键，释放出磷酸基团供结合。磷酸基团与 "结合剂"（BA）结合，而 "结合剂 "会被铽标记的供体珠识别。这导致能量从铽元素转移到 FAM，后者在 520 纳米波长处发出荧光信号。如果未与磷酸基团结合，则铽标记的珠子在 λ=490 纳米波长处发光。荧光强度是用能读取 TR-FRET 的荧光平板阅读器测量的，520 纳米波长的增加直接对应于 PDE3A 的活性。
西洛他胺(Cilostamide)对 PDE3A 活性的抑制作用
UniProt #
Q14432
产品组分
| 内容 | 型号 | 规格 |
储存温度 |
| PDE3A时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒 | 60706-01 | 96孔 | -20°C |
| PDE3A时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒 | 60706-02 | 384孔 | -20°C |
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操作手册 |
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常温 |
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FAQ
References
Maurice, DH. Front. Biosci. 2005; 10:1221-8.
Metabolic effects of newly synthesized phosphodiesterase-3 inhibitor 6-[4-(4-methylpiperidin-1-yl)-4-oxobutoxy]-4-methylquinolin-2(1H)-one on rat adipocytes
Bagher Alinejad, Reza Shafiee-Nick, ..., Ahmad Ghorbani
DARU Journal of Pharmaceutical Sciences | 2015 Feb 21 | PubMed ID: 25880831
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