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与泛素（Ub）共价连接是调节蛋白质稳定性、功能和定位的主要翻译后修饰。泛素化是三种酶的协同作用：Ub 激活酶（E1）、Ub 连接酶（E2）和 Ub 连接酶（E3）。泛素化的特异性和效率主要由 E3 酶决定，它通过与 E2∼Ub 共轭物和底物蛋白质结合来指导 Ub 结合级联的最后一步。这一步确保 Ub 从 E2∼Ub 转移到底物上，导致其单泛素化或多泛素化。
卡西塔斯 B 线淋巴瘤原癌基因-b（CBL-B）是一种 RING 型 E3 连接酶，是 T 细胞活化的负调控因子。它包含一个 N 端酪氨酸激酶结合结构域、一个 SRC 同源结构域和负责催化功能的 RING 结构域。此外，CBL-B 还含有富含脯氨酸的区域，可介导其与磷酸化蛋白的结合，还含有一个二聚化结构域。CBL-B 与大量靶蛋白相互作用，这些靶蛋白与细胞增殖、分化和细胞形态的控制有关。CBL-B 的泛素连接酶活性通过酪氨酸 363 的磷酸化而上调，酪氨酸 363 磷酸化使 CBL-B 从自身抑制构象中打开，从而允许 E2 和底物结合。使 CBL-B 磷酸化的激酶，如 AXL、Tyro3 和 SRC，也是泛素化的底物。
CBL-B驱动AXL泛素化链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒利用隐色酸铕标记的泛素供体和 Cy5 标记的泛素受体完成 TR-FRET 配对。由于 TR-FRET 供体和受体都与多泛素链结合在一起，因此这种检测方法不能检测单泛素化。基于 FRET 的格式无需耗时的洗涤步骤，因此特别适用于 HTS 应用以及多泛素化的实时分析。
图 1：CBL-B驱动AXL泛素化链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒示意图。
CBL-B驱动AXL泛素化链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒是一种灵敏的高通量筛选（HTS）TR-FRET 检测试剂盒，旨在以 384 反应的均一格式检测 CBL-B 对酪氨酸激酶 AXL 的 E3 连接酶活性。
甲基化泛素和 CBL-B-IN-1 对 CBL-B 驱动的 AXL 泛素化的抑制作用。
UniProt #
CBL-B: Q13191; AXL: P30530
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产品组分
内容 型号 规格 储存温度
CBL-B驱动AXL泛素化链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒 78821 384孔 -20°C 操作手册
1 1 常温
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文件资源
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78821-CBL-B驱动AXL泛素化链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒 操作手册 78821-CBL-B驱动AXL泛素化链内时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)分析试剂盒相关单页 宣传单页 -
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