hsa-let-7a-5p模拟物

hsa-let-7a-5p模拟物，hsa-let-7a-5p mimic，是一种化学合成的 miRNA 模拟物，可以模拟内源性 miRNA、上调 miRNA 活性并用于功能获得研究。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。

关键词

hsa-let-7a-5p模拟物

所属分类

抑制剂

目录号

V89552

获取报价

猜你喜欢

产品描述
产品组分
文件资源
营销中心
注意事项
FAQ
文献追踪

hsa-let-7a-5p 模拟物是一种化学合成的 miRNA 模拟物，可以模拟内源性 miRNA、上调 miRNA 活性并用于功能获得研究。

体外研究 (In Vitro)	1. miRNA的制备1.1 miRNA产品是附着在管壁上的透明或半透明干膜，使用前短暂离心，确保miRNA在管底。用无核酸酶水溶解miRNA，配成20 μM原液。对于5 nmol miRNA：加入250 μL无核酸酶水，涡旋多次溶解。对于20 nmol miRNA：加入1000 μL无核酸酶水，涡旋多次溶解。1.2 （可选）将miRNA分装到一个或多个试管中，以减少冻融次数（<5次）。1.3 将配制好的原液保存在-20℃或-80℃。2. 细胞制备2.1 提前接种细胞，达到合适的细胞密度后进行转染。转染前的细胞活力影响转染结果。 3.转染3.1配制转染混合物A和B注：对于miRNA模拟物，我们建议工作浓度为50nM，miRNA产品的最佳工作浓度随细胞类型和研究目的的不同而不同，取决于miRNA、细胞系和所选的分析方法，为了确定最佳结果的浓度，应使用不同的浓度进行优化实验，优化的浓度范围为10~200nM。6孔板每孔：A：245 μL无血清培养基+5 μL miRNA；B：240 μL无血清培养基+10 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂12孔板每孔：A：97.5 μL无血清培养基+2.5 μL miRNA； B：95 μL无血清培养基+5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂 24孔板每孔： A：48.75 μL无血清培养基+1.25 μL miRNA；B：47.5 μL无血清培养基+2.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂 96孔板每孔： A：24.75 μL无血清培养基+0.25 μL miRNA；B：24.5 μL无血清培养基+0.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂若使用其他品牌的转染试剂，则需根据具体情况调整转染试剂加入量。 3.2将稀释后的A与B轻轻混匀，室温放置15-20分钟。 3.3 吸去细胞培养基，PBS 洗涤。 3.4 将 miRNA-转染试剂混合物加入细胞中。 6 孔板每孔：加入 1500 μL 新鲜无血清培养基，再加入 500 μL 转染混合物（A+B），混匀。 12 孔板每孔：加入 800 μL 新鲜无血清培养基，再加入 200 μL 转染混合物（A+B），混匀。 24 孔板每孔：加入 400 μL 新鲜无血清培养基，再加入 100 μL 转染混合物（A+B），混匀。 96 孔板每孔：加入 50 μL 新鲜无血清培养基，再加入 50 μL 转染混合物（A+B），混匀。 3.5 37°C 培养细胞 1-3 天。然后对转染后的细胞进行分析。转染后约6小时，可将不含双抗和血清的培养基换成含血清和双抗的正常培养基。注意：转染过程中不要在培养基中添加抗生素，否则会降低细胞转染效率，甚至造成细胞死亡。

体外研究 (In Vitro)

1. miRNA的制备1.1 miRNA产品是附着在管壁上的透明或半透明干膜，使用前短暂离心，确保miRNA在管底。用无核酸酶水溶解miRNA，配成20 μM原液。对于5 nmol miRNA：加入250 μL无核酸酶水，涡旋多次溶解。对于20 nmol miRNA：加入1000 μL无核酸酶水，涡旋多次溶解。1.2 （可选）将miRNA分装到一个或多个试管中，以减少冻融次数（<5次）。1.3 将配制好的原液保存在-20℃或-80℃。2. 细胞制备2.1 提前接种细胞，达到合适的细胞密度后进行转染。转染前的细胞活力影响转染结果。 3.转染3.1配制转染混合物A和B注：对于miRNA模拟物，我们建议工作浓度为50nM，miRNA产品的最佳工作浓度随细胞类型和研究目的的不同而不同，取决于miRNA、细胞系和所选的分析方法，为了确定最佳结果的浓度，应使用不同的浓度进行优化实验，优化的浓度范围为10~200nM。6孔板每孔：A：245 μL无血清培养基+5 μL miRNA；B：240 μL无血清培养基+10 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂12孔板每孔：A：97.5 μL无血清培养基+2.5 μL miRNA； B：95 μL无血清培养基+5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂 24孔板每孔： A：48.75 μL无血清培养基+1.25 μL miRNA；B：47.5 μL无血清培养基+2.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂 96孔板每孔： A：24.75 μL无血清培养基+0.25 μL miRNA；B：24.5 μL无血清培养基+0.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA转染试剂若使用其他品牌的转染试剂，则需根据具体情况调整转染试剂加入量。 3.2将稀释后的A与B轻轻混匀，室温放置15-20分钟。 3.3 吸去细胞培养基，PBS 洗涤。 3.4 将 miRNA-转染试剂混合物加入细胞中。 6 孔板每孔：加入 1500 μL 新鲜无血清培养基，再加入 500 μL 转染混合物（A+B），混匀。 12 孔板每孔：加入 800 μL 新鲜无血清培养基，再加入 200 μL 转染混合物（A+B），混匀。 24 孔板每孔：加入 400 μL 新鲜无血清培养基，再加入 100 μL 转染混合物（A+B），混匀。 96 孔板每孔：加入 50 μL 新鲜无血清培养基，再加入 50 μL 转染混合物（A+B），混匀。 3.5 37°C 培养细胞 1-3 天。然后对转染后的细胞进行分析。转染后约6小时，可将不含双抗和血清的培养基换成含血清和双抗的正常培养基。注意：转染过程中不要在培养基中添加抗生素，否则会降低细胞转染效率，甚至造成细胞死亡。

*注: 文献方法仅供参考, IVDSHOW并未独立验证这些方法的准确性。

分子量	13928.39
外观&性状	Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

产品组分

内容	型号	规格	储存温度
hsa-let-7a-5p模拟物	V89552-01	500mg	-20°C
hsa-let-7a-5p模拟物	V89552-02	1g	-20°C
hsa-let-7a-5p模拟物	V89552-03	5g	-20°C
操作手册	1	1	常温