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rno-let-7f-1-3p抑制剂是一种互补的单链成熟 miRNA,其整个链已被甲氧基修饰。 miRNA抑制剂通过特异性结合成熟miRNA,阻止miRNA与其靶基因的互补配对,从而抑制miRNA的功能,可用于miRNA功能丧失的研究。
体外研究 (In Vitro) 1. miRNA 制备 1.1 miRNA 产品为透明或半透明干膜,贴于管壁。使用前,快速离心管以确保 miRNA 位于底部。在无核酸酶水中重构 miRNA,以提供浓度为 20 μM 的储备溶液。要溶解 5 nmol miRNA,请添加 250 μL 无核酸酶水并涡旋多次。要溶解 20 nmol miRNA,请添加 1000 μL 无核酸酶水并涡旋多次。 1.2(优先)为了减少冷冻和解冻次数,将miRNA分装到一个或多个管中(<5)。 1.3 将准备好的母液保存在-20℃至-80℃之间。 2. 细胞准备 2.1 预先接种细胞,获得所需细胞密度后,进行细胞转染。转染结果受转染前细胞活力的影响。 3. 适应 3.1 准备好转染混合物 A 和 B 注意:我们建议 miRNA 抑制剂使用 100 nM 的工作浓度。针对不同细胞类型和研究目标的 miRNA 产品的理想浓度根据所选的 miRNA、细胞系和分析技术而有所不同。应利用不同的浓度进行优化测试,以确定产生最佳结果的浓度。最佳浓度范围是20~500nM。六孔板各: B:121 μL 无血清培养基 + 4 μL PolyFast 转染试剂; A:120 μL 无血清培养基 + 5 μL miRNA。 24孔板各孔:B:24μL无血清培养基+1μL PolyFast转染试剂;答:23.75 μL 无血清培养基 + 1.25 μL miRNA。 96孔板各孔内容物如下: B:4.8μL无血清培养基+0.2μL PolyFast转染试剂;答:4.75 μL 无血清培养基 + 0.25 μL miRNA。如果使用不同品牌的转染试剂,必须根据具体情况修改添加量。 3.2 将较弱版本的 A 和 B 混合。室温孵育十五分钟。 3.3 取出培养基,PBS洗细胞。 3.4 向细胞加入miRNA转染试剂混合物。 6孔板每孔加入1750μL不含双抗的新培养基后,加入250μL转染混合物(A+B)并充分混匀。 24孔板每孔加入50μL转染混合物(A+B),与450μL不含双抗的新培养基充分混匀。 96孔板每孔加入90μL不含双抗的新培养基后,加入10μL转染混合物(A+B),充分混匀。 3.5 让细胞在 37°C 下放置一到三天。之后,检查转染的细胞。
*注: 文献方法仅供参考, IVDSHOW并未独立验证这些方法的准确性。
分子量 6416.27
相关CAS号 rno-let-7f-1-3p antagomir
外观&性状 Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code 2934.99.9001
存储方式 Powder -20°C 3 years
4°C 2 years
In solvent -80°C 6 months
-20°C 1 month
运输条件 Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
关键词:- rno-let-7f-1-3p抑制剂
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产品组分
内容 型号 规格 储存温度
rno-let-7f-1-3p抑制剂 V81320-01 500mg -20°C rno-let-7f-1-3p抑制剂 V81320-02 1g -20°C rno-let-7f-1-3p抑制剂 V81320-03 5g -20°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
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