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重组组蛋白H3K4ac(EPL)是利用专利的表达蛋白连接(EPL)技术生成的。EPL可用于生成甲基化、乙酰化或磷酸化的组蛋白。在EPL中,组蛋白球状结构域与含有具有所需位点特异性修饰的N端组蛋白尾部的肽段连接。连接反应保留了天然组蛋白的键,所得重组蛋白更接近模拟天然组蛋白。
组蛋白H3是核小体的核心成分之一。核小体是染色质的最小亚基,由146个碱基对的DNA缠绕在一个核心组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两个)上组成。组蛋白H1是一种连接蛋白,存在于核小体核心与DNA进出点之间的界面处。
重组组蛋白H3赖氨酸4乙酰化(H3K4ac)蛋白是利用表达蛋白连接(EPL)技术制备而成。截短的人组蛋白H3.2在大肠杆菌中表达,并通过快速蛋白质液相色谱(FPLC)进行纯化。纯化后的蛋白随后通过天然肽键与含有乙酰化赖氨酸4的N端组蛋白尾肽相连。全长蛋白在冻干前需再次纯化。蛋白浓度通过组蛋白H3的摩尔消光系数及280nm处的吸光度来测定。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,重组组蛋白纯度>98%,并通过高分辨率电喷雾飞行时间质谱(ESI-TOF)进行确认。重组组蛋白的分子量为15,269道尔顿。
重组组蛋白H3K4ac(EPL)适用于在组蛋白翻译后修饰分析中作为阳性对照,用作组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。

重组组蛋白H3赖氨酸4乙酰化修饰产物经SDS-PAGE凝胶分析。2微克重组组蛋白H3赖氨酸4乙酰化产物(泳道1)和1微克重组组蛋白H3赖氨酸4乙酰化产物(泳道2)的SDS-PAGE凝胶分析。泳道4含有分子量标记物。
关键词:- 重组组蛋白H3T3ph(EPL)
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
重组组蛋白H3K4ac(EPL)
31275 25ug
-80°C
操作手册
1 1 常温
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注意事项
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