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重组组蛋白H3K4me2(甲基化赖氨酸类似物)是利用获得专利的**甲基化赖氨酸类似物(MLA)**技术生成的。在甲基化赖氨酸类似物技术中,甲基化组蛋白是通过化学烷基化反应生成的,该反应使用赖氨酸的甲基化类似物氨乙基半胱氨酸替代目标残基上现有的赖氨酸。氨乙基半胱氨酸在结构和化学性质上与赖氨酸相似,不过它含有一个硫化物,取代了赖氨酸的ϒ-亚甲基。甲基化赖氨酸类似物技术可精确控制甲基化的位点和程度。甲基化赖氨酸类似物技术受美国专利第8,278,112号保护。
组蛋白H3是核小体的核心成分之一。核小体是染色质的最小亚基,由146个碱基对的DNA缠绕在一个核心组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两个)上组成。组蛋白H1是一种连接蛋白,存在于核小体核心与DNA进出点之间的界面处。
重组非洲爪蟾组蛋白H3赖氨酸4二甲基化(H3K4me2)在大肠杆菌中生产,并通过快速蛋白质液相色谱(FPLC)进行纯化。该蛋白质在氨基酸110处存在半胱氨酸到丙氨酸的替换。重组甲基化组蛋白通过引入甲基赖氨酸类似物(MLA)的化学烷基化反应进行特异性甲基化。这种特定的化学处理能够精确控制甲基化的位点和程度。经高分辨率电喷雾电离飞行时间质谱(ESI-TOF)验证,每个甲基化反应的完成度超过99%。使用组蛋白H3的摩尔消光系数和280nm处的吸光度来测定蛋白质浓度。通过SDS-PAGE分析,重组组蛋白的纯度大于98%。重组组蛋白的分子量为15,289道尔顿。
重组组蛋白H3K4me2(MLA)适合作为组蛋白翻译后修饰分析中的阳性对照、作为组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。

重组组蛋白H3赖氨酸4二甲基化产物经SDS-PAGE凝胶分析。1.5微克重组组蛋白H3(C110A)(第2泳道)、重组组蛋白H3赖氨酸4单甲基化产物(第3泳道)、重组组蛋白H3赖氨酸4二甲基化产物(第4泳道)和重组组蛋白H3赖氨酸4三甲基化产物(第5泳道)的SDS-PAGE分析。分子量标志物在第1泳道。
关键词:- 重组组蛋白H3K4me2(MLA)
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
重组组蛋白H3K4me2(MLA)
31209 25ug
-80°C
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1 1 常温
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