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重组组蛋白H3K4me3(EPL)

重组组蛋白H3K4me3(EPL),Recombinant Histone H3K4me3 (EPL),非常适用作组蛋白翻译后修饰分析中的阳性对照、作为组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。


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重组组蛋白H3K4me3(EPL)


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  • 重组组蛋白H3K4me3(EPL)是利用获得专利的表达蛋白连接(EPL)技术生成的。EPL可用于生成甲基化、乙酰化或磷酸化的组蛋白。在EPL中,组蛋白球状结构域与含有N端组蛋白尾部且具有所需位点特异性修饰的肽段相连。连接反应保留了天然的组蛋白键,生成的重组蛋白更接近模拟天然组蛋白。

    组蛋白H3是核小体的核心成分之一。核小体是染色质的最小亚单位,由146个碱基对的DNA缠绕在核心组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两个)上组成。组蛋白H1是一种连接蛋白,存在于核小体核心与DNA进出点之间的界面处。

    重组组蛋白H3赖氨酸4三甲基化(H3K4me3)蛋白是利用表达蛋白连接(EPL)技术制备的。截短的人组蛋白H3.2在大肠杆菌中表达,并通过快速蛋白质液相色谱(FPLC)进行纯化。纯化后的蛋白随后通过天然肽键与含有赖氨酸4三甲基化的N端组蛋白尾肽连接。全长蛋白在冻干前再次进行纯化。使用组蛋白H3的摩尔消光系数和280nm处的吸光度来测定蛋白质浓度。通过SDS-PAGE分析,重组组蛋白的纯度>98%,并通过高分辨率电喷雾电离飞行时间质谱(ESI-TOF)进行确认。重组组蛋白的分子量为15,267道尔顿。

    重组组蛋白H3K4me3(EPL)适合用作组蛋白翻译后修饰分析中的阳性对照、作为组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。

    重组组蛋白H3赖氨酸4三甲基化修饰产物经SDS-PAGE凝胶分析。2微克重组组蛋白H3赖氨酸4三甲基化产物(泳道1)和1微克重组组蛋白H3赖氨酸4三甲基化产物(泳道2)的SDS-PAGE分析。

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    重组组蛋白H3K4me3(EPL)

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