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重组组蛋白H3K9me2(EPL)是利用获得专利的表达蛋白连接(EPL)技术制备而成。EPL可用于制备甲基化、乙酰化或磷酸化的组蛋白。在EPL中,组蛋白球状结构域与含有N端组蛋白尾且具有所需位点特异性修饰的肽段连接。该连接反应保留了天然组蛋白的键,所得重组蛋白更接近模拟天然组蛋白。
组蛋白H3是核小体的核心成分之一。核小体是染色质的最小亚基,由146个碱基对的DNA缠绕在一个核心组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两个)上组成。组蛋白H1是一种连接蛋白,存在于核小体核心与DNA进出点之间的界面处。
重组组蛋白H3赖氨酸9二甲基化(H3K9me2)蛋白采用表达蛋白连接(EPL)技术制备。截短的人源组蛋白H3.2在大肠杆菌中表达,并通过快速蛋白质液相色谱(FPLC)纯化。纯化后的蛋白随后通过天然肽键与含有赖氨酸9二甲基化的N端组蛋白尾肽连接。全长蛋白在冻干前再次纯化。使用组蛋白H3的摩尔消光系数和280nm处的吸光度测定蛋白质浓度。通过SDS-PAGE分析,重组组蛋白纯度>98%,并通过高分辨率电喷雾飞行时间质谱(ESI-TOF)确认。重组组蛋白的分子量为15,253道尔顿。
重组组蛋白H3K9me2(EPL)适合用作组蛋白翻译后修饰分析中的阳性对照、作为组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。

重组组蛋白H3赖氨酸9二甲基化产物经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。1微克重组组蛋白H3赖氨酸9二甲基化产物(泳道1)和2微克重组组蛋白H3赖氨酸9二甲基化产物(泳道2)的SDS-PAGE分析。
关键词:- 重组组蛋白H3K9me2(EPL)
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
重组组蛋白H3K9me2(EPL)
31280 25ug
-80°C
操作手册
1 1 常温
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