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重组组蛋白H3K18me3（MLA）是利用获得专利的甲基化赖氨酸类似物（MLA）技术生成的。在MLA技术中，甲基化组蛋白是通过化学烷基化反应生成的，该反应使用赖氨酸的甲基化类似物氨乙基半胱氨酸替代目标残基上现有的赖氨酸。氨乙基半胱氨酸在结构和化学性质上与赖氨酸相似，不过它含有一个硫化物取代了赖氨酸的γ-亚甲基。MLA技术可精确控制甲基化的位点和程度。MLA技术受美国专利号8,278,112保护。
组蛋白H3是核小体的核心成分之一。核小体是染色质的最小亚基，由146个碱基对的DNA缠绕在一个核心组蛋白八聚体（H2A、H2B、H3和H4各两个）上组成。组蛋白H1是一种连接蛋白，存在于核小体核心与DNA进出点之间的界面处。
重组非洲爪蟾组蛋白H3赖氨酸18位点三甲基化修饰（H3K18me3）在大肠杆菌中表达，并通过快速蛋白质液相色谱（FPLC）进行纯化。该蛋白质在第110位氨基酸处存在半胱氨酸突变为丙氨酸的情况。重组甲基化组蛋白通过化学烷基化反应特异性地进行甲基化，该反应引入了甲基赖氨酸类似物（MLA）。这种特殊的化学处理使得甲基化的位点和程度能够得到精确控制。经高分辨率电喷雾飞行时间质谱（ESI-TOF）验证，每次甲基化反应的完成度均超过99%。蛋白质浓度根据组蛋白H3的摩尔消光系数及280nm处的吸光度来测定。经SDS-PAGE分析，重组组蛋白的纯度大于98%。重组组蛋白的分子量为15,299道尔顿。
重组组蛋白H3K18me3(MLA)用于在组蛋白翻译后修饰分析中作为阳性对照，作为组蛋白修饰酶的底物，或用于体外生成染色质。
重组组蛋白H3赖氨酸18位点三甲基化产物经SDS-PAGE凝胶检测。5微克重组组蛋白H3赖氨酸18单甲基化产物（泳道2）、重组组蛋白H3赖氨酸18双甲基化产物（泳道3）和重组组蛋白H3赖氨酸18三甲基化产物（泳道4）的SDS-PAGE分析。泳道1为分子量标记。
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
重组组蛋白H3K18me3(MLA)
31261 50ug
-80°C
操作手册
1 1 常温
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