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重组组蛋白H3K23me2(MLA)

重组组蛋白H3K23me2(MLA),Recombinant Histone H3K23me2 (MLA),非常适用作组蛋白翻译后修饰分析中的阳性对照、作为组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。


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重组组蛋白H3K23me2(MLA)


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31263

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  • 重组组蛋白H3K23me2(MLA)是利用获得专利的甲基化赖氨酸类似物(MLA)技术制备而成。在MLA技术中,甲基化组蛋白通过化学烷基化反应生成,该反应使用赖氨酸的甲基化类似物氨乙基半胱氨酸替代目标残基上现有的赖氨酸。氨乙基半胱氨酸在结构和化学性质上与赖氨酸相似,不过它含有一个硫化物,取代了赖氨酸的ϒ-亚甲基。MLA技术可精确控制甲基化的位点和程度。MLA技术受美国专利号8,278,112保护。

    组蛋白H3是核小体的核心成分之一。核小体是染色质的最小亚基,由146个碱基对的DNA缠绕在一个核心组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两个)上组成。组蛋白H1是一种连接蛋白,存在于核小体核心与DNA进出点之间的界面处。

    重组非洲爪蟾组蛋白H3赖氨酸23二甲基化(H3K23me2)在大肠杆菌中生产,并通过快速蛋白液相色谱(FPLC)进行纯化。该蛋白在第110位氨基酸处存在半胱氨酸到丙氨酸的替换。重组甲基化组蛋白通过引入甲基赖氨酸类似物(MLA)的化学烷基化反应进行特异性甲基化。这种特定的化学处理能够精确控制甲基化的位点和程度。经高分辨率电喷雾电离飞行时间质谱(ESI-TOF)验证,每次甲基化反应的完成度超过99%。使用组蛋白H3的摩尔消光系数和280纳米处的吸光度来测定蛋白质浓度。通过SDS-PAGE分析,重组组蛋白的纯度大于98%。重组组蛋白的分子量为15,286道尔顿。

    重组组蛋白H3K23me2(MLA)用于在组蛋白翻译后修饰分析中作为阳性对照,作为组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。

    重组组蛋白H3赖氨酸23位点二甲基化产物经SDS-PAGE凝胶检测。5微克重组组蛋白H3赖氨酸23单甲基化产物(泳道2)、重组组蛋白H3赖氨酸23二甲基化产物(泳道3)和重组组蛋白H3赖氨酸23三甲基化产物(泳道4)的SDS-PAGE分析。分子量标准物在泳道1。

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    重组组蛋白H3K23me2(MLA)

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