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重组组蛋白H3K27me1(MLA)是利用获得专利的**甲基化赖氨酸类似物(MLA)**技术制备而成。在MLA技术中,甲基化组蛋白通过化学烷基化反应生成,该反应使用赖氨酸的甲基化类似物氨乙基半胱氨酸取代目标残基上现有的赖氨酸。氨乙基半胱氨酸在结构和化学性质上与赖氨酸相似,不过它含有一个硫化物,取代了赖氨酸的γ-亚甲基。MLA技术可对甲基化位点和程度进行精确控制。MLA技术受美国专利号8,278,112保护。
组蛋白H3是核小体的核心成分之一。核小体是染色质的最小亚基,由146个碱基对的DNA缠绕在一个核心组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两个)上组成。组蛋白H1是一种连接蛋白,存在于核小体核心与DNA进出点之间的界面处。
重组非洲爪蟾组蛋白H3赖氨酸27单甲基化(H3K27me1)在大肠杆菌中生产,并通过快速蛋白质液相色谱(FPLC)纯化。该蛋白质在氨基酸110处含有半胱氨酸到丙氨酸的替换。重组甲基化组蛋白通过引入甲基赖氨酸类似物(MLA)的化学烷基化反应进行特异性甲基化。这种特殊的化学处理能够精确控制甲基化的位点和程度。经高分辨率电喷雾电离飞行时间质谱(ESI-TOF)验证,每个甲基化反应的完成度超过99%。蛋白质浓度通过组蛋白H3的摩尔消光系数和280nm处的吸光度来测定。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,重组组蛋白纯度大于98%。重组组蛋白的分子量为15,271道尔顿。
重组组蛋白H3K27me1(MLA)用于在组蛋白翻译后修饰分析中作为阳性对照,作为组蛋白修饰酶的底物,或用于体外生成染色质。

重组组蛋白H3赖氨酸27单甲基化产物经SDS-PAGE凝胶分析。1.5微克重组组蛋白H3(C110A)(泳道2)、重组组蛋白H3赖氨酸27单甲基化产物(泳道3)、重组组蛋白H3赖氨酸27二甲基化产物(泳道4)以及重组组蛋白H3赖氨酸27三甲基化产物(泳道5)的SDS-PAGE分析。泳道1为分子量标准品。
关键词:- 重组组蛋白H3K27me1(MLA)
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产品组分
内容
型号
规格 储存温度
重组组蛋白H3K27me1(MLA)
31214 50ug
-80°C
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1 1 常温
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