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赖氨酸(K)特异性去甲基化酶5B(KDM5B),又称Jumonji,富含AT的相互作用结构域1B(JARID1B),是一种组蛋白去甲基化酶,可特异性地使组蛋白H3(H3K4)的赖氨酸4去甲基化,从而在定义组蛋白密码中发挥核心作用。KDM5B 使三甲基化、二甲基化和单甲基化 H3K4 去甲基化。它不会使组蛋白 H3K9 或 H3K27 去甲基化。KDM5B 作为 FOXG1B 和 PAX9 的转录辅阻遏物。KDM5B 通过抑制 BRCA1 和 HOXA5 等抑癌基因诱导乳腺癌细胞增殖。相反,它可以作为黑色素瘤的肿瘤抑制剂。
重组JARID1B/KDM5B蛋白适用于酶动力学研究、抑制剂筛选和选择性分析。
比活性:H3K4me3去甲基化酶。
催化速率:20周转/酶分子组
蛋白去甲基化酶测定条件:将3.3μM H3K4me3(aa 1-21)肽与不同浓度的重组JARID1B/KDM5B蛋白在含有50 mM HEPES pH 7.5、0.02%Triton X100、100 μM 2OG、100 μM抗坏血酸、50 μM(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O、1 mM TCEP的反应缓冲液中孵育,室温下1小时。采用HTRF和MALDI-TOF进行检测。重组JARID1B / KDM5B(登录号NP_006609,全长)以Sf9表达,含有分子量为179.9 kDa的N端FLAG-Tag。重组蛋白的纯度为 SDS-PAGE 的 >75%。

重组 JARID1A / KDM5A 蛋白凝胶。JARID1A / KDM5A 蛋白在 8%的 SDS-PAGE 凝胶上检测,并用考马斯蓝染色。
重组JARID1B/KDM5B蛋白活性测定。将3.3μM H3K4me3肽与50 nM JARID1B / KDM5B在反应缓冲液中室温孵育2小时。采用MALDI-TOF检测反应产物。使用单个3.3μM H3K4me3肽作为阴性对照。催化能力:20周转/酶分子。
重组JARID1B/KDM5B蛋白活性测定。将3.3μM H3K4me3肽与JARID1B/KDM5B在室温下在反应缓冲液中孵育1小时。JARID1B / KDM5B 酶用于 HTRF 测定以确定酶线性。使用H3K4me2特异性抗体测量去甲基化肽(H3K4me2)。关键词:- 重组JARID1B/KDM5B蛋白
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
重组JARID1B/KDM5B蛋白
31432 20ug
-80°C 重组JARID1B/KDM5B蛋白
31832 1mg
-80°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ

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Yamane K 等人 (2007) Mol Cell 25:801-812
Barrett A et al. (2007) Int J Cancer 121:265-275
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