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衣壳蛋白VP1。与衣壳蛋白VP2和VP3形成具有假T=3对称性的二十面体衣壳(通过相似性)。衣壳直径为300埃,由每种衣壳蛋白的60个拷贝组成,并包裹着病毒正链RNA基因组(通过相似性)。衣壳蛋白VP1主要形成衣壳的顶点(通过相似性)。衣壳蛋白VP1与宿主细胞受体相互作用,使病毒粒子附着到靶宿主细胞上(通过相似性)。这种附着会诱导病毒粒子内化(通过相似性)。酪氨酸激酶可能参与进入过程(通过相似性)。与受体结合后,衣壳会发生构象变化(通过相似性)。衣壳蛋白VP1的N端(包含两亲性α螺旋)和衣壳蛋白VP4会暴露出来(通过相似性)。它们共同在宿主膜上形成一个孔,病毒基因组通过该孔转移到宿主细胞的细胞质中(通过相似性)。 衣壳蛋白VP2。与衣壳蛋白VP2和VP3形成具有假T=3对称性的二十面体衣壳(通过相似性)。衣壳直径为300埃,由每种衣壳蛋白的60个拷贝组成,并包裹着病毒正链RNA基因组(通过相似性)。 衣壳蛋白VP3。与衣壳蛋白VP2和VP3形成具有假T=3对称性的二十面体衣壳(通过相似性)。衣壳直径为300埃,由每种衣壳蛋白的60个拷贝组成,并包裹着病毒正链RNA基因组(通过相似性)。 衣壳蛋白VP4。位于衣壳壳的内表面(通过相似性)。与宿主受体结合后,衣壳会发生构象变化(通过相似性)。衣壳蛋白VP4被释放,衣壳蛋白VP1的N端暴露出来,它们共同在宿主膜上形成一个孔,病毒基因组通过该孔转移到宿主细胞的细胞质中(通过相似性)。 衣壳蛋白VP0。是未成熟前衣壳的组成部分,在成熟后会裂解为衣壳蛋白VP4和VP2(通过相似性)。使衣壳在成熟步骤前保持无活性状态(通过相似性)。 蛋白酶2A。一种半胱氨酸蛋白酶,可切割病毒多蛋白和特定的宿主蛋白(通过相似性)。它负责P1和P2区域之间的自催化切割,这是多蛋白中发生的第一次切割(通过相似性)。还能切割宿主翻译起始因子EIF4G1,以关闭带帽的细胞mRNA翻译(通过相似性)。通过切割核孔的宿主成员来抑制宿主核-细胞质蛋白和RNA的运输(通过相似性)。可能通过拮抗应激颗粒的组装或促进其解体来对抗应激颗粒的形成(通过相似性)。 蛋白2B。作为病毒孔蛋白在病毒复制周期中发挥重要作用。在宿主内质网上形成一个孔,从而在受感染细胞的细胞质中释放Ca2+。反过来,高水平的细胞质钙可能触发膜运输以及将病毒内质网相关蛋白运输到病毒质(病毒基因组复制的场所)。 蛋白2C。诱导细胞内膜的结构重排并与之结合。具有RNA结合、核苷酸结合和NTP酶活性。可能通过与衣壳蛋白VP3相互作用在病毒粒子形态发生和病毒RNA衣壳化中发挥作用。 蛋白3AB。将病毒复制复合体定位到膜囊泡表面。与蛋白3CD一起结合参与RNA合成起始的顺式活性RNA元件(CRE)。作为辅因子刺激3D聚合酶的活性,可能是通过核酸伴侣活性。 蛋白3A。将病毒复制复合体定位到膜囊泡表面(通过相似性)。它抑制宿主细胞内质网到高尔基体的运输,并导致高尔基体解体,可能是通过与GBF1相互作用(通过相似性)。这将导致宿主细胞表面的MHC、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体和干扰素受体减少(通过相似性)。通过在病毒复制位点招募ACBD3和PI4KB,在病毒RNA复制中发挥重要作用,从而允许形成病毒复制发生的重排膜结构(通过相似性)。 病毒基因组连接蛋白。作为病毒RNA复制的引物,并与病毒基因组RNA保持共价结合。VPg在引发复制前会尿苷酸化形成VPg-pUpU(通过相似性)。oriI病毒基因组序列可能为此充当模板。然后,VPg-pUpU被RNA依赖的RNA聚合酶用作基因组RNA多聚腺苷酸上的引物来复制病毒基因组(通过相似性)。在感染性病毒粒子的基因组释放到细胞质后,VPg-RNA连接可能被宿主TDP2去除(通过相似性)。在复制周期的晚期,宿主TDP2被排除在病毒RNA合成和衣壳化的位点之外,从而允许子代病毒粒子的产生(通过相似性)。 蛋白3CD。参与病毒复制复合体和病毒多肽成熟。它表现出与蛋白酶3C不同的特异性和催化效率的蛋白酶活性。蛋白3CD缺乏聚合酶活性。蛋白3CD与病毒基因组的5'UTR结合。 RNA指导的RNA聚合酶。在细胞内膜表面复制病毒基因组RNA。可能形成沿着称为界面I的强首尾相互作用传播的亚基线性阵列。将UMP共价连接到VPg的酪氨酸上,用于引发RNA合成。正链RNA基因组首先在病毒诱导的膜囊泡上复制,形成双链RNA基因组复制形式。然后,该双链RNA被用作模板来合成正链RNA基因组。单链(+)RNA基因组要么被翻译、复制,要么被衣壳化。 蛋白酶3C。主要的病毒蛋白酶,介导多蛋白的蛋白水解加工(通过相似性)。切割宿主EIF5B,有助于关闭宿主翻译(通过相似性)。还切割宿主PABPC1,有助于关闭宿主翻译(通过相似性)。切割宿主NLRP1,触发宿主N-甘氨酸介导的自身抑制性NLRP1 N端片段的降解(通过相似性)。
HRV 3C蛋白酶抑制剂筛选分析试剂盒(比色法)提供了一种快速、简便、灵敏且可靠的检测方法,适用于高通量筛选HRV 3C蛋白酶抑制剂。该测定基于3C蛋白酶(源自HRV鼻病毒-14)切割生色肽底物以释放发色团(对硝基苯胺)的能力,后者可使用酶标仪轻松定量。在HRV 3C蛋白酶特异性抑制剂存在的情况下,底物的切割会减少/消除,导致吸光度降低或完全丧失。
这款简单且高通量的适应性检测试剂盒可用于筛选、研究和表征人鼻病毒3C蛋白酶的潜在抑制剂。
人鼻病毒(HRV)感染是普通感冒和其他多种上呼吸道感染最常见的致病因素。鼻病毒属于小核糖核酸病毒科,其基因组为正义单链RNA,可翻译为单一的多蛋白前体。就人鼻病毒而言,病毒多蛋白主要由蛋白酶(2A和3C)加工以生成功能性蛋白质和酶。
人鼻病毒3C蛋白酶(EC:3.4.22.28)是一种半胱氨酸蛋白酶,可识别Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln*Gly-Pro切割位点。
关键词:- HRV 3C蛋白酶抑制剂筛选分析试剂盒(比色法)
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