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mFluor Green 615 染料可以被 532 nm 的绿色激光很好地激发。它具有大的斯托克斯位移，发射~615 nm。 mFluor™ Green 615 染料是水溶性的，用 mFluor™ Green 615 染料制备的蛋白质缀合物在 532 nm 处被充分激发，发出红色荧光。 mFluor™ Green 615 染料和结合物是用于流式细胞仪检测的出色绿色试剂。与 RPE 相比，mFluor™ Green 615 染料的光稳定性要好得多，用于荧光成像应用。
产品优势
1.简单快速，强大的生物分子标记，结合率高
2.荧光亮度、光稳定性、溶解性好，不受pH值影响
3.大的斯托克斯位移
适用范围
标记抗体蛋白质和其他生物分子，用于流式细胞术
实验方案
溶液配制
除非另有说明，所有未使用的储备液应在制备后分装，在 -20°C 下储存避免反复冻融
1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：
将 100 µL 反应缓冲液（例如，pH 值约为 8.5 至 9.0 的 1 M 碳酸氢钠溶液或 1 M 磷酸盐缓冲液）与 900 µL 目标蛋白溶液（例如，抗体、蛋白质浓度 > 2 mg/mL（如果可能））混合得到 1 mL 蛋白质标记储备液。
注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，除去蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，获得好的标记结果。
注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，标记效率会显着降低。为获得合适标记效率，建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.mFluor™ Green 615 SE储备溶液（溶液B）：
将无水DMSO加入到mFluor™Green 615 SE小瓶中制备10mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），立即使用。 染料储备溶液的长期储存会降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免反复冻融。
样本实验方案
（本方案适用 Goat anti-mouse IgG 和mFluor™Green 615 SE的共轭，每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。）
进行偶联反应：
1.使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL，蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：建议使用溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比为10:1。如果太少或太高，可以尝试5:1、15:1和20:1来确定合适的染料/蛋白质比。
2.在室温下继续旋转或摇动反应混合物30-60分钟
纯化偶联
（以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料蛋白偶联物的一个例子）
1.按照产品说明准备Sephadex G-25柱。
2.将“进行偶联反应”步骤中的反应混合物装入Sephadex G-25柱的顶部。
3.当样品刚低于顶部树脂表面时，立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。
4.向样品中加入更多的PBS（pH 7.2-7.4）完成柱子纯化。将含有目标染料-蛋白质缀合物的组分合并。
注意：如果需要立即使用，染料-蛋白质缀合物物需要用染色缓冲液稀释，并分装。
注意：为了长期储存，染料蛋白缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
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产品组分
内容 型号 规格 储存温度
mFluor Green615琥珀酰亚胺酯
1166 1mg
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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Self-Assembled Bis-Acridinium Tweezer Equilibria Controlled by Multi-Responsive Properties.
Authors: Hu, Johnny and Launay, Jean-Pierre and Chaumont, Alain and Heitz, Valérie and Jacquot de Rouville, Henri-Pierre
Journal: Chemistry (Weinheim an der Bergstrasse, Germany) (2024): e202401866Cytotoxicity of acridinium-based ionic liquids: Structure-activity relationship and mechanistic studies.
Authors: Roy, Ritik and Chick, Phoenix and York, Edward and Rawling, Tristan
Journal: Chemico-biological interactions (2024): 111042Acridinium-Based Chemiluminescent Receptor-Ligand Binding Assay for Protein/Peptide Hormones.
Authors: Daubermann, André Guilherme and Dressano, Keini and de Oliveira Ceciliato, Paulo Henrique and Moura, Daniel S
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2024): 253-263Zwitterionic Acridinium Amidate: A Nitrogen-Centered Radical Catalyst for Photoinduced Direct Hydrogen Atom Transfer.
Authors: Entgelmeier, Lukas-Maximilian and Mori, Soichiro and Sendo, Shion and Yamaguchi, Rie and Suzuki, Ryuhei and Yanai, Takeshi and Mancheño, Olga García and Ohmatsu, Kohsuke and Ooi, Takashi
Journal: Angewandte Chemie (International ed. in English) (2024): e202404890Crystal structure, intermolecular interactions, charge-density distribution and ADME properties of the acridinium 4-nitrobenzoate and 2-amino-3-methylpyridinium 4-nitrobenzoate salts: a combined experimental and theoretical study.
Authors: Balasubramanian, Hemalatha and Mariappan, Petchi Raman and Poomani, Kumaradhas
Journal: Acta crystallographica. Section C, Structural chemistry (2024): 115-122
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