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实时聚合酶链式反应（实时PCR），也称为定量聚合酶链式反应（qPCR），是一种基于聚合酶链式反应（PCR）的流行分子生物学实验室技术。它在PCR过程中（即实时）监测目标DNA分子的扩增情况，而不像传统PCR那样在反应结束时才监测。实时PCR可用于定量（定量实时PCR）和半定量（即检测DNA分子数量高于或低于某一水平）（半定量实时PCR）。 实时PCR中检测PCR产物有两种常用方法：（1）非特异性荧光染料，可结合任何双链DNA；（2）序列特异性DNA探针，由寡核苷酸组成，标记有荧光报告基团，仅在探针与其互补序列杂交后才能被检测到。 对于第一种方法，用于实时检测PCR的DNA结合染料有两个要求：（a）与双链DNA结合时荧光增强；（b）对PCR的抑制作用最小。SYBR Green主要用于各种qPCR应用中。我们最近开发了Q4ever™Green，这是新一代的SYBR Green，旨在解决SYBR Green的一些局限性，例如酶抑制问题。Q4ever™Green可用于PCR，对PCR的抑制作用小，且灵敏度更高。 Q4ever™Green可用于监测任何双链DNA序列的扩增。只要PCR引物设计合理且反应条件明确，就无需使用探针，从而降低检测的设置和运行成本。与SYBR Green一样，其主要缺点是可能产生假阳性信号，即因为Q4ever™Green染料可结合任何双链DNA，也可能结合非特异性的双链DNA序列。因此，设计出不会扩增非目标序列的引物并进行熔解曲线分析至关重要。
工作溶液配制
Q4ever Green工作溶液（50X）
使用水或TE缓冲液稀释2000X Q4ever Green储备溶液以制成50X Q4ever Green储备溶液。操作步骤
建议使用以下协议。 如果需要，可以调整方案以达到佳效果。
设置PCR反应如下：
5 µL 10X聚合酶缓冲液（不含镁）
2.5 µL的50 mM MgCl2
2 µL 50X Q4ever Green工作溶液
2 µL的5 mM dUTP
1-5个单位的DNA聚合酶
加入所需的cDNA
每个引物100-1000 nM（正向和反向引物的终浓度）
用dH2O将终体积调整为50 µL。 -
产品组分
内容 型号 规格 储存温度
Q4ever绿色核酸染料(1250X DMSO Solution)
17608 100ul
-20°C Q4ever绿色核酸染料(1250X DMSO Solution)
17609 2ml
-20°C 操作手册
1 1 常温
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文件资源
文件下载 文件内容 资源说明 
17608-Q4ever绿色核酸染料(1250X DMSO Solution) 操作手册 17608-Q4ever绿色核酸染料(1250X DMSO Solution)相关单页 宣传单页 -
营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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MinION Nanopore-based detection of Clavibacter nebraskensis, the corn Goss's wilt pathogen, and bacteriomic profiling of necrotic lesions of naturally-infected leaf samples.
Authors:
Xu, Renlin and Adam, Lorne and Chapados, Julie and Soliman, Atta and Daayf, Fouad and Tambong, James T
Journal:
PloS one (2021): e0245333
Direct detection of Helicobacter pylori from biopsies of patients in Lagos, Nigeria using real-time PCR-a pilot study.
Authors:
Ajayi, A and Jolaiya, T and Smith, S I
Journal:
BMC research notes (2021): 90
Quantitative Assessment of Parental Somatic Mosaicism for Copy-Number Variant (CNV) Deletions.
Authors:
Liu, Qian and Grochowski, Christopher M and Bi, Weimin and Lupski, James R and Stankiewicz, Paweł
Journal:
Current protocols in human genetics (2020): e99
Detection of Phytophthora infestans by Loop-Mediated Isothermal Amplification, Real-Time LAMP, and Droplet Digital PCR.
Authors:
Ristaino, Jean B and Saville, Amanda C and Paul, Rajesh and Cooper, Donald C and Wei, Qingshan
Journal:
Plant disease (2020): 708-716
Portable and accurate diagnostics for COVID-19: Combined use of the miniPCR thermocycler and a well-plate reader for SARS-CoV-2 virus detection.
Authors:
González-González, Everardo and Trujillo-de Santiago, Grissel and Lara-Mayorga, Itzel Montserrat and Martínez-Chapa, Sergio Omar and Alvarez, Mario Moisés
Journal:
PloS one (2020): e0237418
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