吖啶橙

吖啶橙，Acridine orange，是一种核酸选择性荧光阳离子染料，可用于细胞周期测定。更多视频请关注视频号【艾维缔】。哔哩哔哩【IVDSHOW】。抖音【军哥聊表观】。

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吖啶橙

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吖啶橙是一种核酸选择性荧光阳离子染料，可用于细胞周期测定。它是细胞可渗透的，并通过插入或静电吸引力与DNA和RNA相互作用。当与DNA结合时，它与荧光素在光谱上非常相似，激发大值为502nm，发射大值为525nm（绿色）。当它与RNA结合时，激发大值移至460nm（蓝色），发射大值移至650nm（红色）。染料通常用于落射荧光显微镜。

吖啶橙是吖啶的一种衍生物，最初被开发用于快速标记和识别细菌。随着时间的推移，它已成为一种用于染色核酸的荧光团。从化学性质上讲，它呈中性电荷且弱碱性，这有助于其穿过细胞膜进行扩散。因此，它可用于活细胞染色。进入细胞质后，它往往会在低pH值的酸性细胞区室中积累并被保留。正因为如此，吖啶橙被用作溶酶体的染色剂。

由于具有弱碱性，吖啶橙还能与呈酸性的双链DNA、单链DNA和RNA结合。人们认为它与双链DNA的结合是通过嵌入方式实现的。这会导致核酸周围的吖啶橙浓度较低，从而产生绿色荧光，其激发峰在490纳米，发射峰在520纳米。另一方面，吖啶橙与RNA的结合被认为是通过静电力发生的。这会使荧光团浓度更高，并产生红色荧光，其激发峰在460纳米，发射峰在640纳米。

吖啶橙有时会与碘化丙啶联合使用，以评估细胞活力。由于吖啶橙具有细胞渗透性，它会对活细胞和死细胞都进行染色。而碘化丙啶无法透过细胞膜，只会对死细胞进行染色。两者联合使用时，可对活细胞和死细胞进行定量分析。

产品物理化学光谱特性

分子量：301.82

外观：亮黄色

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：500

发射波长(nm)：526

染色细胞示例

以下程序适用于大多数细胞类型。生长培养基，细胞密度，其他细胞类型的存在和其他因素可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的真实或明显染色，导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

1）制备1-10mM DMSO储备溶液。如果储存在-20°C，DMSO储备液可以保存6个月。

2）使用适合您样品的固定方案。

3）通过离心沉淀细胞，并将细胞重悬于缓冲盐溶液或培养基中，在pH 7.4下进行佳染料染色。培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。

4）使用1和10μM之间的浓度添加AO染色并孵育15至60分钟作为指导。

注意：在初的实验中，好在整个建议的范围内尝试几种染料浓度，以确定产生佳染色的浓度。
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- 吖啶橙
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Spectral studies of N-nonyl acridine orange in anionic, cationic and neutral surfactants

Authors:

Wiosetek-Reske AM, Wysocki S.

Journal:

Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc (2006): 1118

Re: The evaluation of micronucleus frequency by acridine orange fluorescent staining in peripheral blood of rats treated with lead acetate. (Mutagenesis, 20, 411-415, 2005)

Authors:

Celik A, Ogenler O, Comelekoglu U.

Journal:

Mutagenesis (2006): 267

Improvement of the acridine orange-protein-surfactant system for protein estimation based on aromatic ring stacking effect of sodium dodecyl benzene sulphonate

Authors:

Wang F, Yang J, Wu X, Wang X, Guo C, Jia Z.

Journal:

Luminescence (2006): 186

Vesicle disruption, plasma membrane bleb formation, and acute cell death caused by illumination with blue light in acridine orange-loaded malignant melanoma cells

Authors:

Hiruma H, Katakura T, Takenami T, Igawa S, Kanoh M, Fujimura T, Kawakami T.

Journal:

J Photochem Photobiol B. (2006)

The use of acridine orange base (AOB) as molecular probe to characterize nonaqueous AOT reverse micelles

Authors:

Falcone RD, Correa NM, Biasutti MA, Silber JJ.

Journal:

J Colloid Interface Sci (2006): 356