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CRISPR/Cas9系统是一项应用广泛的基因组编辑技术，其原理是在sgRNA，也称gRNA (guide RNA)的引导下通过Cas9核酸酶对基因组DNA的靶向序列进行特异性位点切割。gRNA是由18-20 bp与靶基因序列互补的CRISPR RNA (crRNA)序列，以及能与Cas9核酸酶结合的Trans-activating crRNA (tracrRNA)序列所组成的融合产物。在细胞内，gRNA和Cas9核酸酶结合，并通过与靶基因互补的序列引导Cas9核酸酶切割靶基因位点3 '端NGG前间隔序列邻近基序(PAM)相邻的上游DNA序列，引起靶基因位点产生移码突变，从而导致最终目的基因的缺失突变。
本试剂盒基于PCR扩增和依赖T7 RNA聚合酶的体外转录进行一步法合成sgRNA。试剂盒内提供预混sgRNA reaction mix，包含Scaffold Template序列以及用于扩增该序列的下游引物，使用者仅需设计合成Target-specific DNA oligo上游引物，即可通过本试剂盒获得相应sgRNA。合成的sgRNA经纯化后可与Cas9 mRNA（型号：R1015）共转染细胞，或在表达Cas9蛋白的细胞内进行基因编辑，也可以与Cas9核酸酶混合进行酶切鉴定实验。一步法试剂盒合成sgRNA相比两步法操作更为简单，但产量低于两步法，如需两步法合成sgRNA推荐使用HyperScribe™ Two-Step sgRNA Synthesis Kit（型号：K1421）。
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
一步法sgRNA合成试剂盒
K1424-01 20次
-20°C 一步法sgRNA合成试剂盒
K1424-02 40次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
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