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CRISPR/Cas9系统是一项应用广泛的基因组编辑技术，其原理是在sgRNA，也称gRNA (guide RNA)的引导下通过Cas9核酸酶对基因组DNA的靶向序列进行特异性位点切割。gRNA是由18-20 bp与靶基因序列互补的CRISPR RNA (crRNA)序列，以及能与Cas9核酸酶结合的Trans-activating crRNA (tracrRNA)序列所组成的融合产物。在细胞内，gRNA和Cas9核酸酶结合，并通过与靶基因互补的序列引导Cas9核酸酶切割靶基因位点3 '端NGG前间隔序列邻近基序(PAM)相邻的上游DNA序列，引起靶基因位点产生移码突变，从而导致最终目的基因的缺失突变。
本试剂盒是基于PCR扩增和依赖T7 RNA聚合酶的体外转录进行两步法合成sgRNA。试剂盒内提供预混Template Mix，包含与使用者设计的目标特异性序列部分重叠序列以及用于扩增该序列的下游引物，使用者仅需设计合成Target-specific DNA oligo上游引物，即可通过本试剂盒获得相应sgRNA。合成的sgRNA经纯化后可与Cas9 mRNA（型号：R1015）共转染细胞，或在表达Cas9蛋白的细胞内进行基因编辑，也可以与Cas9核酸酶混合进行酶切鉴定实验。
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
两步法sgRNA合成试剂盒
K1421-01 20次
-20°C 两步法sgRNA合成试剂盒
K1421-02 100次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
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