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高水平的野生型KRAS会导致细胞复制和生长减慢，并增加细胞凋亡。这可能由细胞应激、特定类型的辐射、化学信号和其他刺激物诱导产生。野生型KRAS还可能通过与突变型KRAS蛋白形成二聚体，来抑制突变型KRAS的过度激活。由于KRAS突变导致了超过30%的人类癌症，因此研究野生型和突变型KRAS在行为上的差异尤为重要。影响核苷酸交换（GDP向GTP转化）反应的化合物为抑制KRAS驱动型肿瘤中的肿瘤细胞生长提供了一种新方法。2021年，美国食品药品监督管理局（FDA）批准将AMG510（索托拉西布）——一种强效的KRAS G12C抑制剂，用于治疗非鳞状非小细胞肺癌。
KRAS亚型B偶联核苷酸交换TR-FRET检测试剂盒是一种时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）检测试剂盒，专为KRAS亚型B拮抗剂/抑制剂的筛选和分析而设计。它可监测效应蛋白（如RAF1的Ras结合域（RBD-cRaf））与KRAS的结合情况。KRAS亚型B偶联核苷酸交换TR-FRET检测试剂盒采用便捷的384孔板格式，包含足够的纯化重组GDP结合型KRAS亚型B、GTP、交换因子SOS1（七less同源物1的儿子）（氨基酸564-1049）、效应蛋白RBD-cRAF（氨基酸50-140）、检测缓冲液和添加剂，可进行400次反应。
将含有GDP结合型KRAS亚型B的样本与SOS1和GTP共同孵育，以进行核苷酸交换。GDP结合型KRAS亚型B处于失活状态，不会与cRAF的Ras结合域（RBD）相互作用。SOS1协助KRAS释放GDP，使GTP能够占据核苷酸结合口袋。这会导致KRAS发生构象变化，使其能够与RBD-cRAF结合。随后将RBD-cRAF加入反应中。孵育后，加入受体染料和供体染料。产生的时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）信号可通过荧光酶标仪进行测量。信号强度与GTP结合型KRAS的存在量成正比。
Assay Kit Format
TR-FRET
Species
Human
Materials Required But Not Supplied
- Fluorescent microplate reader capable of measuring Time Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (TR-FRET)
- Adjustable micropipettor and sterile filter tips
- Rotating or rocker platform
UniProt #
P01116
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
KRAS亚型B偶联核苷酸交换TR-FRET检测试剂盒
82716-01 384次
-20°C KRAS亚型B偶联核苷酸交换TR-FRET检测试剂盒
82716-02 768次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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