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众所周知,RAS突变导致了超过30%的人类癌症。KRAS(G12C)是在肺癌和结肠癌中频繁出现的KRAS突变之一。G12C突变会使KRAS更易处于激活状态(与GTP结合),从而放大导致肿瘤发生的信号通路。近期研究发现了一种名为AMG510(安进公司研发)的小分子,它能将KRAS的构象锁定在GDP结合的失活状态,进而阻断KRAS(G12C)介导的信号通路。影响核苷酸交换(GDP向GTP转化)反应的化合物,可能会成为一种新的方法,用于抑制由KRAS(G12C)驱动的肿瘤细胞生长。
KRAS(G12C)偶联核苷酸交换检测试剂盒旨在通过监测效应蛋白(如Raf1的Ras结合域,即RBD-cRaf)与KRAS(G12C)的结合,来筛选和分析KRAS(G12C)拮抗剂/抑制剂。使用该试剂盒时,只需在微量滴定板上通过几个简单步骤即可完成核苷酸交换检测。首先,将含有负载GDP的KRAS(G12C)的样品与SOS1和GTP一起孵育,以进行核苷酸交换。接下来,加入RBD-cRAF并孵育,使效应蛋白与RAS结合。然后,加入受体珠和供体珠并孵育以进行检测,之后读取Alpha计数。
SOS1(七less之子)是一种鸟嘌呤核苷酸交换因子,可促进GDP与GTP的交换。结合GDP的KRAS(G12C)处于失活状态,不会与cRAF的Ras结合域(RBD)相互作用。SOS1协助KRAS(G12C)释放GDP,使GTP能够占据核苷酸结合口袋。这会导致KRAS(G12C)发生构象变化,使其能够与RBD-cRAF结合。KRAS(G12C)偶联核苷酸交换检测试剂盒利用GST标记的RBD-cRAF和His标记的KRAS(G12C),在Alpha检测中测定KRAS(G12C)与RBD-cRAF的结合情况。谷胱甘肽受体珠和镍螯合物供体珠通过KRAS(G12C)与RBD-cRAF的结合而处于邻近范围,从而在激光激发后实现供体珠到受体珠的能量转移。
Assay Kit Format
AlphaLISA®
Species
Human
Supplied As
The KRAS(G12C) Coupled Nucleotide Exchange Assay Kit comes in a convenient 384-well format, with enough purified recombinant GDP-loaded KRAS(G12C) Isoform A, GTP, exchange factor SOS1, an effector protein RBD-cRAF, assay buffer and additives for 400 reactions.
Target(s)
KRAS (G12C)
UniProt #
P01116
关键词:- KRAS(G12C)偶联核苷酸交换检测试剂盒
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
KRAS(G12C)偶联核苷酸交换检测试剂盒
CN78565-01 384次
-20°C KRAS(G12C)偶联核苷酸交换检测试剂盒
CN78565-02 768次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后,按照说明书建议保存于-20°C。 -
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