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高水平的野生型KRAS会导致细胞复制和生长减慢，以及细胞凋亡速度加快。这可能由细胞应激、特定类型的辐射、化学信号和其他刺激引发。因此，由此产生的KRAS反应被认为是一种防御机制，用于抵消KRAS过度激活的影响。野生型KRAS还可能通过与突变型KRAS蛋白形成二聚体来防止突变型KRAS的过度激活。
对野生型和突变型KRAS的行为差异进行研究尤为重要，因为突变与超过30%的人类癌症相关。能够影响核苷酸交换（GDP向GTP转化）反应的化合物，可能会带来一种新方法，从而抑制由KRAS驱动的肿瘤中肿瘤细胞的生长。
KRAS（G12V）亚型B偶联核苷酸交换检测试剂盒旨在通过监测效应蛋白（如Raf1的Ras结合域（RBD-cRaf））与KRAS的结合，对KRAS（G12V）亚型B的拮抗剂/抑制剂进行筛选和分析。首先，将含有GDP负载的KRAS（G12V）亚型B的样品与SOS1和GTP一起孵育，进行核苷酸交换。接下来，加入RBD-cRAF并孵育，以实现效应蛋白与RAS的结合。然后，加入 acceptor 和 donor 磁珠并孵育以进行检测，之后读取Alpha计数。
SOS1（七less之子）是一种鸟嘌呤核苷酸交换因子，可促进GDP与GTP的交换。结合GDP的KRAS（G12V）亚型B处于失活状态，不与cRAF的Ras结合域（RBD）相互作用。SOS1协助KRAS（G12V）亚型B释放GDP，使GTP能够占据核苷酸结合口袋。这会导致KRAS发生构象变化，使其能够与RBD-cRAF结合。KRAS（G12V）亚型B偶联核苷酸交换检测试剂盒利用GST标记的RBD-cRAF和His标记的KRAS（G12V）亚型B，在AlphaLISA®检测中测定KRAS与RBD-cRAF的结合情况。谷胱甘肽 acceptor 珠和镍螯合物供体珠通过KRAS与RBD-cRAF的结合而处于邻近范围，从而在激光激发后实现从供体珠到acceptor珠的能量转移。
Assay Kit Format
AlphaLISA®
Species
Human
Supplied As
The 384-well AlphaLISA® Assay Kit contains a sufficient amount of purified recombinant GDP-loaded KRAS(G12V) Isoform B, GTP, exchange factor SOS1, effector protein RBD-cRAF, assay buffer, and additives for 400 reactions.
Target(s)
KRAS (G12V)
UniProt #
P01116
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
KRAS(G12V)亚型B偶联核苷酸交换检测试剂盒
CN78825-01 384次
-20°C KRAS(G12V)亚型B偶联核苷酸交换检测试剂盒
CN78825-02 768次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Wang, X., et al., 2022 J Med Chem 65: 3123-33.
Hillig, R.C., et al., 2019 PNAS USA 116 (7): 2551-2560
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