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DCAF15是E3蛋白连接酶复合物DDB1-DDA1-CUL4-Rbx1的底物结合组件，参与靶蛋白的泛素化和蛋白酶体降解过程。DCAF15与底物蛋白的结合会激活该复合物的E3连接酶活性，进而导致蛋白底物发生泛素化并最终被降解。DCAF15最重要的靶标之一是RBM39（RNA结合基序蛋白39）。RBM39是肿瘤靶向mRNA和蛋白表达中的关键因子。近期研究表明，RBM39是芳香族磺酰胺类化合物意外的作用靶标，这类化合物可作为分子胶，在RBM39与DCAF15相关的E3泛素连接酶复合物之间发挥作用，从而选择性降解该靶标。E7820就是一种芳香族磺酰胺类化合物，它能将RBM39募集到Rbx-CUL4-DDA1-DDB1-DCAF15 E3连接酶复合物中，使其发生泛素化并被蛋白酶体降解。开发参与RBM39募集的新型分子胶（MG）和蛋白水解靶向嵌合体（PROTACs），为未来利用DCAF15降解其他目标蛋白提供了研究框架。
RBM39-DCAF15结合分子胶/PROTAC®优化试剂盒旨在测试和分析靶向RBM39（RNA结合蛋白39）与DCAF15（DDB1和CUL4相关因子15）相互作用的分子胶（MG）/PROTAC。该RBM39-DCAF15结合分子胶/PROTAC®优化试剂盒采用便捷的AlphaLISA®格式，包含足够的优化检测和检测缓冲液、纯化的重组RBM39（氨基酸245-530）以及Rbx1/CUL4B/DDB1/DCAF15/DDA1复合物，可进行384次反应。本试剂盒还包含分子胶E7820和精氨酸作为对照。
研究的分子胶/PROTAC®与DCAF15复合物和RBM39共同孵育，使它们彼此靠近。DCAF15含有组氨酸标签（His-tag），可被供体珠识别。RBM39含有谷胱甘肽S-转移酶标签（GST tag），能与谷胱甘肽（GSH）-AlphaLISA™受体珠结合。供体珠受激发后会产生单线态氧，单线态氧继而激发受体珠，使其发出的光强度与RBM39和DCAF15之间的相互作用程度成正比。
Assay Kit Format
AlphaLISA®
Species
Human
Materials Required But Not Supplied
- AlphaLISA GSH Acceptor Beads, 250 µg (PerkinElmer #AL109C)
- Alpha Nickel Donor Beads, 5 mg/ml (PerkinElmer #AS101D)
- Optiplate 384 (PerkinElmer #6007290)
- AlphaScreen microplate reader
- Adjustable micropipettor and sterile tips
Target(s)
RBM39, DCAF15
UniProt #
Q66K64
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产品组分
内容 型号
规格 储存温度
RBM39-DCAF15分子胶/PROTAC优化试剂盒
82251-01 384次
-20°C RBM39-DCAF15分子胶/PROTAC优化试剂盒
82251-02 768次
-20°C 操作手册
1 1 常温
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营销中心
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注意事项
保存建议 厂家推荐蓝冰运输。当您收到产品后，按照说明书建议保存于-20°C。 -
FAQ
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References
Nunes, J., et al. 2019 ACS Med Chem Lett; 10(7): 1081-1085
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